[发明专利]一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸毒性的方法

摘要

本发明涉及一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸(PFOS)生物毒性的方法，属于环境检测技术领域。具体是选用轮虫作为模式生物，此种生物分布广泛、繁殖迅速、世代时间短，存活、繁殖和行为等对环境理化因子的变化敏感；通过不同浓度的PFOS水溶液对轮虫种群密度的改变评价其对生态系统的影响，然后以其对轮虫生活史的影响确定PFOS的作用机制。本发明克服了目前测定水中PFOS生物毒性中周期长、操作复杂的困难，提供了一个简便、灵敏、系统的检测水中PFOS毒性的方法，该方法方便、快速、成本低廉。

主权项

一种利用轮虫检测水中全氟辛烷磺酸(PFOS)毒性的方法，包括步骤如下：1)轮虫的培养用轮虫培养液对轮虫进行“克隆”培养，以绿藻培养液培养的、处于指数增长期的淡水绿藻为饵料，培养时间为六个月以上，实验前用轮虫培养液对轮虫进行两周以上的预培养，培养在20±1℃、持续光照条件下进行；2)急性毒性试验将全氟辛烷磺酸(PFOS)设为100.0、10.0、1.0、0.1和0.01mg/L 5个浓度梯度，每个梯度设置4个重复，另设1个空白对照，从预培养的试管中随机吸取带非混交卵的轮虫雌体若干个置于培养皿中进行培养，2h后收集孵化出的轮虫幼体，将轮虫幼体放入六孔板中，加入测试液，试验在20±1℃、无光照的恒温培养箱中进行，采用机率单位法分别求得其LC50值；3)测定不同浓度PFOS对轮虫种群增长率的影响通过种群增长率实验评价不同浓度PFOS对轮虫种群增长率的影响，96h后，对每个试管中轮虫的非混交雌体、混交雌体和不带卵雌体分别进行计数，然后全数返回原培养器皿继续培养24h，之后对混交雌体所携带的休眠卵及试管底部沉积的休眠卵进行计数；4)测定不同浓度PFOS对轮虫生殖策略的影响设置了不同浓度PFOS，另加1个空白对照(轮虫培养液)用于生命表实验，记录轮虫产第一枚卵所需的时间；并测量其体长体宽，检测PFOS对其生长发育的影响；之后记录轮虫的产卵数、孵化出的幼体数和母体存活情况，并记录第二代幼体非混交雌体与混交雌体的比例，由此进行水中全氟辛烷磺酸(PFOS)毒性的测定。