[发明专利]克隆甘薯褪绿矮化病毒SPCSV全基因组的引物对及方法

摘要

本发明涉及涉及一种克隆甘薯褪绿矮化病毒SPCSV全基因组的引物对及方法。该引物有五对，依次具有如SEQIDNO.1～SEQIDNO.10所示的核苷酸序列；以感染SPCSV的甘薯植株饲养烟粉虱，收集感染SPCSV的烟粉虱，提取其总RNA作为PCR模板，进行反转录，再以反转录产物作为模板，分别利用上述引物进行PCR扩增，对所得片段进行拼接，即获得SPCSV基因组全长序列。本发明所设计引物扩增片段相互重叠，覆盖了SPCSV基因组两条RNA近全长序列；本发明利用带毒烟粉虱克隆甘薯褪绿矮化病毒全基因组的方法，方法简便、有效，省时、省力，为研究SPCSV提供了一个有用工具。

主权项

一种克隆甘薯褪绿矮化病毒SPCSV全基因组的引物对，包括五对引物，其核苷酸序列依次为：RNA1‑1‑5'         5’‑GAAATACTTCCAGCTATCCAAATTTGGTG‑3’RNA1‑2989‑3'      5’‑ATACGTCTCTCTCCAACGACAAC‑3’；RNA1‑2420‑5'     5’‑AGAGAACAACTTCATTTCTACTCAATTGT‑3’RNA1‑5596‑3'     5’‑GATAAATAAGTTTACCTGTATTGTCGGTC‑3’；RNA1‑4410‑5'     5’‑GAGCATCAACTGTGGACGGCGAACCAAGC‑3’RNA1‑8637‑3'     5’‑AACCTAGTTATTTAAATACTAGGTTTTCC‑3’；RNA2‑53‑5'      5’‑CATTGGTTGTCGTCATGACTCGCAT‑3’RNA2‑5599‑3'    5’‑CCAACTTACCAGATTTCGAGAACTGTAC‑3’；RNA2‑4440‑5'     5’‑ATGCGTCTCGTCGTGACGTCCAGACTG‑3’RNA2‑8223‑3'     5’‑GGCCTAGTTATTTAAATACTAGGTTTTCC‑3’ 。