[发明专利]含有荧光素酶基因的四膜虫细胞株及其构建方法和应用无效
| 申请号： | 201210185777.0 | 申请日： | 2012-06-06 |
| 公开（公告）号： | CN102925464A | 公开（公告）日： | 2013-02-13 |
| 发明（设计）人： | 王伟;张鹏幸;许静;梁爱华 | 申请（专利权）人： | 山西大学 |
| 主分类号： | C12N15/53 | 分类号： | C12N15/53;C12N1/11;C12N15/79;C12Q1/02;C12R1/90 |
| 代理公司： | 山西五维专利事务所(有限公司) 14105 | 代理人： | 杨耀田 |
| 地址： | 030006 山*** | 国省代码： | 山西;14 |
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| 摘要： | 含有荧光素酶基因的四膜虫细胞株及其构建方法和应用。通过PCR技术将萤火虫荧光素酶基因的N-端和C-端序列优化为四膜虫偏爱密码子，将优化后的萤火虫荧光素酶基因LUC连接到载体pBX中，获得含有该基因的重组质粒pBX-LUC，通过基因枪粒子轰击法将其转化入嗜热四膜虫B2086细胞内，通过细胞内同源重组和巴龙霉素抗性筛选,细胞中MTT1基因被LUC基因所取代，获得工程化细胞株B2086-LUC。工程化细胞株B2086-LUC在特异的重金属诱导下表达荧光素酶，通过加入荧光底物D-Luciferin显色，检测放大荧光强度，进而通过定量的数据来反应环境中重金属污染物的情况，检测方法快速、灵敏、易操作。其在水体环境重金属污染生物监测中有广泛的应用前景。 | ||
| 搜索关键词： | 含有 荧光 基因 四膜虫 细胞株 及其 构建 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种荧光素酶基因，其核苷酸序列为SEQ ID NO：2。
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