[发明专利]1型登革热快速金标诊断试纸条

摘要

本发明公开了一种用于1型登革热诊断的重组抗原及其快速金标诊断试纸条。其主要针对于1型登革热诊断的外膜蛋白DIII区重组抗原及可同时检测1型登革病毒感染者血清中IgM、IgG抗体的快速金标诊断试纸条。利用基因克隆技术获得1型登革病毒的外膜蛋白DIII区重组抗原，纯化后即可用于免疫学诊断。快速金标诊断试纸条可同时检测1型登革病毒感染者血清中IgM、IgG抗体，可判断患者的感染状态，并对患者作出早期诊断，这对于控制传染源，减少疾病的传播起着重要的作用。此外，由于金标试纸条无需特殊仪器，无需训练有素的专业人员，可以满足基层医院、农村卫生院等临床检测的需要，而且大大的降低了成本，方便了患者，适用于大规模的血清流行病学调查。

主权项

一组1型登革热快速金标诊断试纸条的溶液组分，其特征是：(1)重组抗原溶解液：SDS         0.1％                   甘氨酸      250mmol/L                   Tris.C1     25mmol/L其中，重组抗原为重组抗原pro‑DEN1EDIII，其核苷酸序列为：gacaaactga ccttaaaagg gatgtcatat gtgatgtgca caggctcatt caagttagag 60aaagaagtgg ctgagaccca gcatggaact gttctagtgc aggttaaata cgaaggaaca 120gatgcaccat gcaagatccc cttttcgacc caagatgaga aaggagtaac ccagaatggg 180agattgataa cagccaaccc catagtcact gacaaagaaa aaccagtcaa cattgaggca 240gaaccacctt ttggtgagag ttacatcgtg gtaggagcag gtgaaaaagc tctgaaacta 300agctggttca agaaaggaag cagcataggg aaaatgcttg aagcaactgc ccgaggagca 360cgaaggatgg ccatccta                                               378其所编码的氨基酸序列为：Asp Lys Leu Thr Leu Lys Gly Met Ser Tyr Val Met Cys Thr Gly Ser1               5                   10                  15Phe Lys Leu Glu Lys Glu Val Ala Glu Thr Gln His Gly Thr Val Leu            20                  25                  30Val Gln Val Lys Tyr Glu Gly Thr Asp Ala Pro Cys Lys Ile Pro Phe        35                  40                  45Ser Thr Gln Asp Glu Lys Gly Val Thr Gln Asn Gly Arg Leu Ile Thr    50                  55                  60Ala Asn Pro Ile Val Thr Asp Lys Glu Lys Pro Val Asn Ile Glu Ala65                  70                  75                  80Glu Pro Pro Phe Gly Glu Ser Tyr Ile Val Val Gly Ala Gly Glu Lys                85                  90                  95Ala Leu Lys Leu Ser Trp Phe Lys Lys Gly Ser Ser Ile Gly Lys Met            100                 105                 110Leu Glu Ala Thr Ala Arg Gly Ala Arg Arg Met Ala Ile Leu        115                 120                 125(2)胶体金溶液：0.03～0.05％的四氯金酸，加1～2％柠檬酸三钠制备成胶体金颗粒；(3)二抗：羊抗人IgG单抗、羊抗人μ链单抗，羊抗鼠IgG单抗；(4)包被缓冲液：含1～3％蔗糖的磷酸盐缓冲液；(5)基础缓冲液：由厦门波生生物技术有限公司研制，主要含牛血清白蛋白的缓冲液；(6)反应缓冲液：0.01～0.05％NaN3的磷酸盐缓冲液；(7)磷酸盐缓冲液：为在800ml蒸馏水中溶解8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24gKH2PO4，用盐酸调节溶液的pH值至7.2～7.6，加水定容至1L。