[发明专利]用免疫荧光染色处理大豆根尖观察细胞微管骨架的方法无效

专利信息
申请号: 201210191444.9 申请日: 2012-06-11
公开(公告)号: CN102692497A 公开(公告)日: 2012-09-26
发明(设计)人: 杨静;李成云;朱有勇;刘林;施竹凤 申请(专利权)人: 云南农业大学
主分类号: G01N33/533 分类号: G01N33/533
代理公司: 暂无信息 代理人: 暂无信息
地址: 650201 云南*** 国省代码: 云南;53
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摘要: 发明公开了一种用免疫荧光染色处理大豆根尖观察细胞微管骨架的方法,用免疫荧光染色方法处理1-10天的大豆根尖,共聚焦显微镜观察根尖皮层细胞微管骨架;方法简便、准确、快速。
搜索关键词: 免疫 荧光 染色 处理 大豆 根尖 观察 细胞 微管 骨架 方法
【主权项】:
一种用免疫荧光染色处理大豆根尖观察细胞微管骨架的方法,其特征在于,用免疫荧光染色方法处理1‑10天的大豆根尖,共聚焦显微镜观察根尖皮层细胞微管骨架;所述免疫荧光染色方法处理方法为:将大豆根尖放入固定液抽气10min,室温固定1hr;固定完毕后用PEMT洗三次,每次10min;37℃条件下酶解1hr;酶解后PEM冲洗三次,每次10min;用0.1M PBS(pH7.2)溶液配制NaBH4,使其浓度为1mg/ml,再用配制好的1mg/ml的NaBH4处理大豆根尖20min;室温用50mM Gly封闭30min;加一抗,4℃过夜,冲洗一抗:PBS冲洗三次,每次10min;加二抗(1∶600),37℃、闭光条件下,3hr;冲洗二抗:PBS冲洗三次,每次10min;加上抗荧光淬灭剂后,封片。
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