[发明专利]一种微生物种属分析方法无效
申请号: | 201210202522.0 | 申请日: | 2012-06-19 |
公开(公告)号: | CN103509851A | 公开(公告)日: | 2014-01-15 |
发明(设计)人: | 曹清;李本尚;丁丽霞;周云芳;李璧如;潘淑华;王希华 | 申请(专利权)人: | 上海交通大学医学院附属上海儿童医学中心 |
主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68;C12Q1/04 |
代理公司: | 上海卓阳知识产权代理事务所(普通合伙) 31262 | 代理人: | 巫蓓丽 |
地址: | 200127 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明提供一种微生物种属分析方法,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。该方法较常规通用引物克隆测序法灵敏度和检出率明显提高,且采用的是蓝白斑筛选阳性克隆,速度快、效率高、准确性强,并可用于鉴定真菌,本发明为微生物群落多样性分析、食品微生物的检测和临床病原菌的检测提供了一种快速有效的方法。 | ||
搜索关键词: | 一种 微生物 种属 分析 方法 | ||
【主权项】:
一种微生物种属分析方法,其特征在于,所述的方法依次包括下列步骤:a)设计通用引物;b)以样本DNA为模板,使用步骤a)所述的通用引物扩增得到含有不同微生物基因片段的混合物,并回收产物;c)将步骤b)的产物克隆连入载体,转化感受态细胞,筛选得到阳性克隆;d)以步骤c)所述的阳性克隆为模板进行菌落PCR,回收产物;e)将步骤d)所述的产物进行测序。
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