[发明专利]绿花百合快速繁殖方法

摘要

本发明公开了一种绿花百合快速繁殖方法，该方法为：一、挑选无病斑的绿花百合地下鳞茎上的鳞片叶，洗净，冲洗，灭菌，得到外植体；二、将外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，培养两个月后产生愈伤组织；三、将愈伤组织接种于继代培养基上进行增殖培养，愈伤组织增大并有新的愈伤组织产生；四、将增大的愈伤组织或新的愈伤组织接种于芽分化培养基上进行芽分化诱导，分化出丛生芽；五、将分化出的丛生芽接种于生根培养基上，获得生根的绿花百合幼苗；六、将生根的绿花百合幼苗移植于栽培基质中培养，得到绿花百合再生植株。本发明的方法不受季节限制，可常年、快速繁殖绿花百合，实现绿花百合的规模化生产，为快速扩大其种群提供切实可行的方法。

主权项

一种绿花百合快速繁殖方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：步骤一、挑选无病斑的绿花百合地下鳞茎上的鳞片叶，用洗涤剂将所述鳞片叶上的泥土洗净，然后用流水冲洗0.5h～1.5h，再采用常规外植体材料灭菌方法对冲洗后的鳞片叶进行灭菌，得到外植体；步骤二、在无菌条件下将步骤一中所述外植体接种于愈伤组织诱导培养基上，培养两个月后整个外植体产生愈伤组织；所述愈伤组织诱导培养基为：在MS常规基本培养基中添加6‑苄氨基嘌呤1.5mg/L～2.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和琼脂6g/L～12g/L；所述愈伤组织诱导培养基的pH值为5.4～5.8；所述培养的条件为：培养温度21℃～25℃，12h光照与12h黑暗交替培养，光照强度为1000Lx～2000Lx；步骤三、在无菌条件下将步骤二中产生的愈伤组织接种于继代培养基上进行增殖培养，增殖培养12～18天后愈伤组织增大并有新的愈伤组织产生；所述继代培养基为：在MS常规基本培养基中添加6‑苄氨基嘌呤0.8mg/L～2.0mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和琼脂6g/L～12g/L；所述继代培养基的pH值为5.4～5.8；所述增殖培养的条件为：培养温度21℃～25℃，12h光照与12h黑暗交替培养，光照强度为1000Lx～2000Lx；步骤四、在无菌条件下将步骤三中所述增大的愈伤组织或新的愈伤组织接种于芽分化培养基上进行芽分化诱导，接种40～50天后分化出丛生芽；所述芽分化培养基为：在MS常规基本培养基中添加6‑苄氨基嘌呤0.5mg/L～1.5mg/L、萘乙酸0.05mg/L～0.2mg/L和琼脂6g/L～12g/L；所述芽分化培养基的pH值为5.4～5.8；所述芽分化诱导的培养条件为：培养温度21℃～25℃，12h光照与12h黑暗交替培养，光照强度为1000Lx～2000Lx；步骤五、在无菌条件下将步骤四中分化出的丛生芽接种于生根培养基上，培养10～15天后获得生根的绿花百合幼苗；所述生根培养基为：在MS常规基本培养基中添加6‑苄氨基嘌呤0.5mg/L～1.2mg/L、萘乙酸 0.02mg/L～0.08mg/L和琼脂6g/L～12g/L；所述生根培养基的pH值为5.4～5.8；所述培养的条件为：培养温度21℃～25℃，12h光照与12h黑暗交替培养，光照强度为1000Lx～2000Lx；步骤六、将步骤五中所述生根的绿花百合幼苗移植于栽培基质中培养，得到绿花百合再生植株；所述栽培基质由草炭、珍珠岩和沙组成，其中草炭、珍珠岩和沙的体积比为5～7∶1～3∶2。