[发明专利]锌指蛋白的快速筛选方法有效
| 申请号： | 201210207952.1 | 申请日： | 2012-06-21 |
| 公开（公告）号： | CN102850429A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 夏海滨;张伟锋 | 申请（专利权）人： | 陕西师范大学 |
| 主分类号： | C07K1/14 | 分类号： | C07K1/14;C12N15/63;C12Q1/66;C12Q1/34;G01N21/64 |
| 代理公司： | 西安永生专利代理有限责任公司 61201 | 代理人： | 申忠才 |
| 地址： | 710062 *** | 国省代码： | 陕西;61 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 一种锌指蛋白的快速筛选方法，通过在线锌指蛋白预测软件预测基因内潜在的锌指蛋白靶序列及相应的锌指，通过重叠聚合酶链式反应获得锌指蛋白库。将锌指蛋白与转录激活结构融合构建嵌合型转录因子，由锌指蛋白靶序列和启动子核心元件组成的嵌合型启动子及其下游的报告基因组成锌指蛋白检测载体；将表达嵌合型转录因子的载体和锌指蛋白检测载体共转染到哺乳动物细胞，进而通过报告基因表达的强弱反应锌指蛋白与靶序列的结合能力。 | ||
| 搜索关键词： | 蛋白 快速 筛选 方法 | ||
【主权项】：
一种锌指蛋白的快速筛选方法，其特征在于它是由下述步骤组成：（1）构建小型锌指蛋白库通过在线锌指蛋白预测软件预测锌指蛋白靶序列并组装锌指蛋白，选择1‑50个锌指蛋白组成小型锌指蛋白库；（2）构建嵌合型转录因子和锌指蛋白检测载体由N端的锌指蛋白和C端的转录激活结构域形成融合蛋白，在锌指蛋白的5＇端插入核定位信号，组装成嵌合型转录因子，由锌指蛋白靶序列和下游的启动子核心元件组成嵌合型启动子，在嵌合型启动子的下游插入报告基因组成锌指蛋白检测载体；（3）在哺乳动物细胞中筛选锌指蛋白将嵌合型转录因子和锌指蛋白检测载体共转染到哺乳动物细胞内作为实验组，将锌指蛋白检测载体单独转染到哺乳动物细胞内作为对照组，实验组的报告基因表达强度高于或等于对照组5倍的是合格的锌指蛋白。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于陕西师范大学，未经陕西师范大学许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201210207952.1/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：喷墨记录装置
- 下一篇：一种基于复合储能的微电网平滑切换控制方法与策略
