[发明专利]一种从金针菇菇根废料中提取具有细胞免疫活性的多糖的方法

摘要

本发明涉及一种从金针菇菇根中提取具有细胞免疫活性多糖的方法，属于生物医药领域。金针菇菇根是金针菇加工过程中，作为废料被切除的根蒂部分，将金针菇菇根烘干、粉碎，制得金针菇菇根超微粉。先将粉碎后的超微粉，加适量85％乙醇室温下浸泡2h，离心取沉淀，以原料为基准，按水料比28mL/g加去离子水，于680W超声处理19.8min，离心取上清液，上清液旋转蒸发浓缩至适量，浓缩液加4倍体积无水乙醇，4℃下沉淀12h，离心取沉淀，沉淀物置60℃烘箱烘干，即得到金针菇菇根粗多糖。采用超声波提取技术，多糖得率为16.20％，与传统的热水浸提相比，得率提高了70％，时间缩短了92％。

主权项

一种从金针菇菇根废料中提取具有细胞免疫活性多糖的方法，其中金针菇菇根为金针菇加工过程中，作为废料被切除的根蒂部分，包括：1)称取金针菇菇根超微粉，加入85％乙醇室温下静置2h以除去部分色素及杂质，离心取沉淀，再加入去离子水，去离子水的用量为10～50mL/g，利用恒温超声提取机，以200～680W超声提取5～25min，离心取上清液；上清液采用Sevag法去蛋白，8000r/min条件下离心10min取上清；2)使用旋转蒸发仪将上清浓缩，向浓缩液中加入4倍体积无水乙醇，4℃下醇沉12h，5000r/min离心15min取沉淀，于60℃烘箱烘干得到金针菇菇根粗多糖粉末；3)将制得的粗多糖粉末用去离子水配成10mg/mL溶液，使用DEAE‑纤维素‑52层析柱，依次用去离子水、0.1、0.3mol/L NaCl溶液梯度洗脱，依次获得3个组分；并通过小鼠巨噬细胞RAW264.7培养实验，发现金针菇菇根粗多糖及其纯化产品具有免疫调节活性。