[发明专利]一种同时测定四逆剂植物药血浆中5种生物碱的方法

摘要

本发明涉及一种同时测定四逆剂植物药血浆中5种生物碱的方法。包括：（1）取哺乳类动物给予四逆剂植物药的含药血浆，加入草乌甲素（内标），氨水碱化，涡旋，加入乙酸乙酯萃取，涡漩，离心，下层液再用乙酸乙酯萃取2次，合并乙酸乙酯层，氮气吹干，残渣用流动相溶解;（2）HPLC-MS-MS测定：流动相：A相为乙腈-0.1%冰醋酸（1:99，v/v），B相为乙腈-水（99:1, v/v）；质谱条件：电喷雾离子源（ESI），采用正离子模式检测；检测离子：乌头碱m/z 646.3→586.3；新乌头碱m/z 632.3→572.3；次乌头碱m/z 616.3→556.3；苯甲酰新乌头原碱m/z 590.3→558.3；苯甲酰乌头原碱m/z 604.3→554.3。本发明适用于四逆剂植物药中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱在哺乳动物体内的药代动力学研究。

主权项

一种同时测定四逆剂植物药血浆中乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱的方法，包括下列步骤：（1）哺乳类血浆样品预处理将哺乳类给予四逆剂植物药的含药血浆，加入内标物，氨水碱化，涡旋30s，按照1:4‑1:10体积比加入乙酸乙酯，涡漩3‑5 min，离心10 min，转速为4000‑10000 r·min‑1，移出上清液，下层液再用1:4体积比乙酸乙酯同样操作2次，合并3次上清液，氮气吹干，残渣用流动相100 μL溶解；（2）HPLC‑MS‑MS测定色谱条件：色谱柱： C18，100 mm×4.6 mm，5 μm，流动相：A相为乙腈‑0.1%冰醋酸（1:99，v/v），B相为乙腈‑水（99:1, v/v）；质谱条件：电喷雾离子源（ESI），采用正离子模式检测。