[发明专利]虫草属真菌指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱

摘要

本发明涉虫草属不同产品形式虫草真菌核苷类成分HPLC指纹图谱建立的方法及其标准指纹图谱。色谱柱为Agilent Zorbax Extend C18(250mm×4.6mm，5μm)，柱温25℃，检测波长260nm，流动相为甲醇-水系统，采用梯度洗脱方式，得到虫草子座、菌丝体和子实体的核苷类成分HPLC指纹图谱。通过六种虫草真菌的子座、菌丝体和子实体HPLC指纹图谱的对比，分别确定三种形式虫草的共有指纹特征，得到标准指纹图谱，并对共有指纹峰定性与定量。本发明的优点是方法简便、稳定、精密度高、重现性好，能从不同形式虫草的整体色谱特征上准确地反映虫草真菌的品质情况。可将其作为虫草质量控制及鉴别的指标之一。

主权项

一种虫草属真菌指纹图谱建立方法，其特征是采取如下步骤：(1)供试样品液的制备：精密称取虫草粉末(过80目筛)1.00g，置于具塞容器中，加水振荡10min使粉末完全浸透，超声提取10～30min，离心，取其上清液用微孔滤膜过滤，滤液作为供试样品溶液；(2)对照品溶液的制备：精密称取虫草素、腺苷、尿苷、鸟苷、肌苷、胞苷及胸苷标准品适量，用超纯水配制成含量各为10‑100μg/mL的标准品对照液；(3)指纹图谱的制作：色谱柱为Agilent Zorbax Extend C18(250mm×4.6mm，5μm)分析柱，温度25℃，检测波长260nm；流动相为甲醇‑水系统，采用浓度在5％‑75％范围洗脱方式；(4)标准指纹图谱的确定：按照本发明提供的方法，对虫草属真菌建立HPLC标准指纹图谱；(5)标准指纹图谱中共有峰的定性定量测定：通过标准品的出峰时间定性，并根据绘制标准曲线计算共有峰所对应化合物的含量。