[发明专利]一种检测斑翅果蝇的方法有效
| 申请号： | 201210235428.5 | 申请日： | 2012-07-09 |
| 公开（公告）号： | CN102758015A | 公开（公告）日： | 2012-10-31 |
| 发明（设计）人： | 廖太林;崔平福;吴军;袁克;纪睿;师振华;陈集翰;孙鹏;周锐 | 申请（专利权）人： | 中华人民共和国昆山出入境检验检疫局 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 南京汇盛专利商标事务所(普通合伙) 32238 | 代理人： | 张立荣 |
| 地址： | 215300 江苏*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | 本发明提供一种检测斑翅果蝇的方法，属于昆虫检疫技术领域，具体涉及检测斑翅果蝇的方法。该方法为提取样品基因组DNA；扩增线粒体COⅠ基因序列、回收扩增片段：以样品基因组DNA为模板，采用COⅠ-F和COⅠ-R扩增线粒体COⅠ基因序列，回收扩增产物；将扩增片段分别采用限制性内切酶ApaⅠ和HinfⅠ进行酶切，酶切产物并进行琼脂糖凝胶电泳；当扩增片段采用限制性内切酶ApaⅠ酶切时，能够得到长度分别为150-200和330-370的两条酶切片段；当扩增产物采用限制性内切酶HinfⅠ酶切时，所述扩增片段不能被切开；此时，样品为斑翅果蝇。该方法操作简单、方便、准确、灵敏。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 检测 翅果 方法 | ||
【主权项】：
一种检测斑翅果蝇的方法，包括下述步骤：（1）提取样品基因组DNA ；（2）扩增线粒体COⅠ基因序列、回收扩增片段：以样品基因组DNA为模板，采用上游引物COⅠ‑F和下游引物COⅠ‑R扩增线粒体COⅠ基因序列，回收扩增片段；所述COⅠ‑F的序列为: 5′‑GGAACATCTCTAAGAATTTTAATT‑3′，所述COⅠ‑R的序列为： 5′‑CTCCAGCTAGTACTGGTAATGATAATAA‑3′；（3）将所述扩增片段分别采用限制性内切酶ApaⅠ和HinfⅠ进行酶切，将酶切产物进行琼脂糖凝胶电泳；（4）判断：当所述扩增片段采用限制性内切酶ApaⅠ酶切时，能够得到长度为160‑190 bp和340‑360 bp的两条酶切片段；当所述扩增片段采用限制性内切酶HinfⅠ酶切时，所述扩增片段不能被切开；此时，样品为斑翅果蝇。
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