[发明专利]一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法有效
申请号: | 201210245283.7 | 申请日: | 2012-07-16 |
公开(公告)号: | CN102854236A | 公开(公告)日: | 2013-01-02 |
发明(设计)人: | 展永;陈娅斐;郭鹏;安海龙;耿金鹏;王晖;袁宏博;赵小明;杜昱光 | 申请(专利权)人: | 河北工业大学 |
主分类号: | G01N27/60 | 分类号: | G01N27/60;G01N21/64 |
代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 杨晞 |
地址: | 300070 天*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明涉及一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法,通过该筛选方法筛选出简便易行的TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂壳寡糖作为TMEM16A钙激活氯离子通道筛选实验的阳性对照物,壳寡糖可以筛选其他可作为TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的药物,为研究TMEM16A/CaCCs激活剂在治疗高血压、CF病、哮喘、胃肠动力学障碍疾病和某些类型的肿瘤等疾病中的应用提供基础。 | ||
搜索关键词: | 一种 tmem16a 激活 氯离子 通道 激活剂 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种TMEM16A钙激活氯离子通道激活剂的筛选方法,其特征在于,包括如下步骤:(a)将TMEM16A质粒稳定转染入哺乳动物细胞HEK293细胞;(b)将黄色荧光蛋白YFP三突变体YFP‑F46L/H148Q/I152L导入步骤(a)中的稳定转染TMEM16A钙激活氯离子通道的HEK293细胞;(c)将候选药物与步骤(b)所述的导入后的细胞进行孵育,再加入含有碘离子的溶液观察,其中若荧光强度减弱,表明所述候选药物可能为TMEM16A钙激活氯离子通道的激活剂,并采用步骤(d)进行进一步验证;(d)使用电生理学方法测定所述候选药物对步骤(a)中电流的影响,其中若加入所述候选药物后电流比对照增大,则表明所述候选药物确定为TMEM16A钙激活氯离子通道的激活剂,若电流比对照没有增大,则确定该候选药物不是TMEM16A钙激活氯离子通道的激活剂。
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