[发明专利]动物疫病三色荧光RT-PCR检测试剂盒及其检测方法

摘要

本发明公开了一种动物疫病三色荧光RT-PCR检测试剂盒及检测方法，特点是该试剂盒包括多重荧光RT-PCR反应母液、阳性对照品、阴性对照品、AMV逆转录酶、Taq聚合酶，其中多重荧光RT-PCR反应母液含有多重10×荧光RT-PCR反应缓冲液、禽流感引物和探针、新城疫引物和探针、禽传染性支气管炎引物和探针、牛血清白蛋白，其中其中各上、下游引物、特异性探针序列如SEQIDNO.1、NO.2、NO.3、NO.4、NO.5、NO.6、NO.7、NO.8、NO.9、NO.10所示，优点是能够同时在同一反应管中实现样本中禽流感、新城疫及禽传染性支气管炎病毒检测，并且特异性强、灵敏度高、快速准确。

主权项

一种动物疫病三色荧光RT‑PCR检测试剂盒，包括多重荧光RT‑PCR反应母液、阳性对照品、阴性对照品、AMV逆转录酶、Taq聚合酶，其特征在于：多重荧光RT‑PCR反应母液含有多重10×荧光RT‑PCR反应缓冲液、禽流感引物、禽流感探针、新城疫引物、新城疫探针、禽传染性支气管炎引物、禽传染性支气管炎探针、牛血清白蛋白，其中各引物及探针的序列如下：禽流感病毒上游引物AIVPf:5′‑GTCTTCTAACCGAGGTCGAAAC‑3′禽流感病毒下游引物AIVPr:5′‑CCCTGCAAAGACATCTTCAAGT‑3′禽流感病毒荧光探针AIVPb:5′‑FAM‑CCCCTCAAAGCCGAGATCGCGC‑BHQ1‑3′新城疫病毒上游引物NDVPf:5′‑ GCCGATAATGGCACCTATAAA‑3′新城疫病毒下游引物NDVPr:5′‑ CCCTTGGTGATTCTATCCGC‑3′新城疫病毒荧光探针NDVPb1：5′‑HEX‑ CGTTTTTGTCTCCTTCCTCCAGACG‑BHQ1‑3′新城疫病毒荧光探针NDVPb2：5′‑HEX‑ CGTCTCTGCCTCCTTCCTCCGGACG‑BHQ1‑3′禽传染性支气管炎病毒上游引物AIBVPf:5′‑GCCTGGAAACGAACGGTAG‑3′禽传染性支气管炎病毒下游引物AIBVPr:5′‑TCCTAGTGCTGTACCCTCGG‑3′禽传染性支气管炎病毒荧光探针AIBVPb: 5′‑ROX‑CCCCGGCACTGGCATCTTTATACCT‑BHQ1‑3′。