[发明专利]含小檗碱的黄檗愈伤组织培养方法无效
申请号: | 201210252230.8 | 申请日: | 2012-07-20 |
公开(公告)号: | CN102742505A | 公开(公告)日: | 2012-10-24 |
发明(设计)人: | 周志强;张玉红;刘彤;金凤新;曲伟娣;温慧 | 申请(专利权)人: | 东北林业大学;张玉红;周志强 |
主分类号: | A01H4/00 | 分类号: | A01H4/00 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 150040 黑龙*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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摘要: | 一种含小檗碱的黄檗愈伤组织培养方法,包括(1)制备外植体;(2)愈伤组织诱导:将(1)处理的黄檗叶片切成0.5×0.5~1.0cm2的块,黄檗茎段切成0.5~1.0cm长的段接入诱导愈伤组织培养基中诱导愈伤组织。该诱导愈伤组织培养基为:在1升MS基本培养基中加入蔗糖20~40g,琼脂粉5.8~7.6g、2,4-二氯苯氧乙酸0.5~2.5mg,6-(苄胺基)嘌呤0.5~2.0mg,pH为5.8,配制好的诱导愈伤组织培养基分装地培养瓶中,每瓶25毫升,在压力为0.1~0.15MPa下灭菌25分钟,将培养瓶置于温度为22~26℃、光照强度为40μmol·m-2·s-1的温度中培养,每天光照12~14小时,培养15~20天,待黄檗愈伤组织形成叶后,继续培养30~50天,至黄檗愈伤组织褐化。 | ||
搜索关键词: | 含小檗碱 黄檗 组织培养 方法 | ||
【主权项】:
1.一种含小檗碱的黄檗愈伤组织培养方法,其特征在于它包括如下步骤:(1)外植体制备材料消毒:在超净工作台上将取下的黄檗叶或黄檗茎段在70%的酒精中浸泡15-20秒,再用10%的次氯酸钠消毒8分钟,期间不断摇动,然后用无菌水冲洗3-5次,每次2分钟,用无菌滤纸吸干表面水分;(2)愈伤组织诱导将(1)中处理好的黄檗叶片切成0.5×0.5~1.0cm2的切块,黄檗茎段切成0.5~1.0cm长的切段接入诱导愈伤组织培养基中诱导愈伤组织,该诱导愈伤组织培养基为在1升MS基本培养基中加入下述的原料及其配比制成:pH为5.8,配制好的诱导愈伤组织培养基分装在培养瓶中,每瓶25毫升,盖好瓶盖,在压力为0.1~0.15MPa下灭菌30分钟,将培养瓶置于温度为22~26℃、光照强度为40μmol·m-2·s-1的培养室中培养,每天光照12~14小时,培养15~20天,待黄檗愈伤组织形成叶后,继续培养30~50天,至黄檗愈伤组织褐化。
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