[发明专利]氧化分解后的白朮挥发油的HPLC指纹图谱的建立方法

摘要

本发明涉及一种中药材中抗癌有效成分指纹图谱的建立方法，具体是一种氧化分解后的白朮挥发油的高效液相色谱（HPLC）指纹图谱的建立方法，包括：供试品溶液的制备、混合对照品溶液的制备、指纹图谱的制作，通过对4个产地的氧化分解后的白朮挥发油HPLC指纹图谱对比，确定了其共有峰。采用本发明所提供的方法所建立的HPLC指纹图谱，可有效地表征氧化分解后的白朮挥发油的质量，有利于控制氧化分解后的白朮挥发油的药用原料、产品生产工艺流程中的各个步骤的质量。

主权项

氧化分解后的白朮挥发油的HPLC指纹图谱的建立方法，其特征在于，所述的氧化分解后的白朮挥发油为：由白朮药材中提取得到的白朮挥发油经氧化分解后，其中苍朮酮的分解率达100%的白朮挥发油，所述的建立方法包括以下步骤：（1）供试品溶液的制备：精密称取氧化分解后的白朮挥发油供试品，用乙腈溶解配制成1.5mg·mL‑1的溶液，此溶液为供试品溶液；（2）混合对照品溶液的制备：用乙腈溶解精密称取的苍朮酮、β‑桉叶醇、白朮内酯Ⅰ、白朮内酯Ⅲ，制得混合溶液A；精密称取β‑榄香烯，用体积比为1:1的乙腈‑乙酸乙酯的溶液溶解，配制成浓度为100µg·mL‑1的溶液B；混合溶液A中加入溶液B，再加入乙腈，配制成苍朮酮0.60mg·mL‑1、β‑桉叶醇0.40mg·mL‑1、白朮内酯Ⅰ50µg·mL‑1、白朮内酯Ⅲ40µg·mL‑1、β‑榄香烯20µg·mL‑1的混合对照品溶液；（3）指纹图谱的制作：色谱条件：Hypersil ODS2色谱柱，4.6mm×250mm，5µm；检测波长200nm～240nm，流动相流速为1.0mL·min‑1，柱温为室温；流动相A为乙腈，流动相为B为水，流动相A与B的体积比为60:40，采用线性梯度洗脱方式：0‑30min，40%B→10%B；30‑45min，10%B→10%B；在上述色谱条件下，精密吸取供试品溶液和混合对照品溶液各5µl进样量，进行高效液相色谱分析，得到氧化分解后的白朮挥发油的指纹图谱。