[发明专利]仅鼻拟人吸烟大鼠免疫功能评价指标的筛选方法有效
申请号: | 201210254861.3 | 申请日: | 2012-07-23 |
公开(公告)号: | CN102735804A | 公开(公告)日: | 2012-10-17 |
发明(设计)人: | 周国俊;储国海;胡瑗;王琴美;黄芳芳 | 申请(专利权)人: | 浙江中烟工业有限责任公司 |
主分类号: | G01N33/00 | 分类号: | G01N33/00 |
代理公司: | 杭州天勤知识产权代理有限公司 33224 | 代理人: | 胡红娟 |
地址: | 310009 浙江*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明公开了一种仅鼻拟人吸烟大鼠免疫功能评价指标的筛选方法,包括步骤:以吸空气大鼠血清、脾淋巴细胞、脾淋巴细胞培养上清液、腹腔巨噬细胞及血液作为正常对照组,经鼻连续抽吸卷烟大鼠血清脾淋巴细胞、脾淋巴细胞培养上清液、腹腔巨噬细胞及血液作为吸烟组;检测各组淋巴细胞增殖能力、腹腔巨噬细胞吞噬情况、IL-6、TNF-α、Ig、IgG、IgE含量和白细胞分类计数;最终筛选出淋巴细胞增殖的刺激指数、IL-6、IgG、IgE含量、白细胞分类计数五个指标作为敏感稳定的评价指标反应吸烟大鼠免疫功能的变化。该方法科学全面,筛选出的评价指标具有良好的敏感稳定性。 | ||
搜索关键词: | 拟人 吸烟 大鼠 免疫 功能 评价 指标 筛选 方法 | ||
【主权项】:
一种拟人吸烟大鼠免疫功能评价指标的筛选方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)以吸空气大鼠的血清、脾淋巴细胞、脾淋巴细胞培养上清液、腹腔巨噬细胞及血液作为正常对照组,经鼻连续抽吸卷烟的大鼠的血清、脾淋巴细胞、脾淋巴细胞培养上清液、腹腔巨噬细胞及血液作为吸烟组;(2)利用MTT增殖法检测步骤(1)中各组脾淋巴细胞增殖能力,比较各组检测结果,分析相互的显著性差异情况,若吸烟组与正常对照组相比有显著性差异,筛选出该指标作为评价指标,反之,放弃;(3)利用鸡红细胞吞噬实验法检测步骤(1)中各组腹腔巨噬细胞吞噬百分比和吞噬指数,比较各组检测结果,分析相互的显著性差异情况,若吸烟组与正常对照组相比有显著性差异,筛选出该指标作为评价指标,反之,放弃;(4)利用ELISA法检测步骤(1)中各组脾淋巴细胞培养上清液和血清中IL‑6及TNF‑α细胞因子浓度,比较各组检测结果,分析相互的显著性差异情况,若吸烟组与正常对照组相比有显著性差异,筛选出该指标作为评价指标,反之,放弃;(5)检测步骤(1)中各组血清中总Ig含量、IgG含量及IgE含量,比较各组检测结果,分析相互的显著性差异情况,若吸烟组与正常对照组相比有显著性差异,筛选出该指标作为评价指标,反之,放弃;(6)利用瑞氏染液染色法检测步骤(1)中各组血液中白细胞分类计数,比较各组检测结果,分析相互的显著性差异情况,若吸烟组与正常对照组相比有显著性差异,筛选出该指标作为评价指标,反之,放弃。
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