[发明专利]白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种鉴定的方法

摘要

本发明属于植物细胞学技术领域。一种鉴定白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种的方法，其包括以下步骤：在幼苗期，取植株第4-7片叶，撕取叶片下面部位的下表皮组织，用碘-碘化钾染液染色，在光学显微镜下观察气孔测量保卫细胞长轴及短轴值，再用椭圆模型计算出保卫细胞周长值，同时观察记数叶绿体数，每片叶观察并记录15个数据；以亲本作为对照，白菜型油菜气孔保卫细胞周长小于58.90um,叶绿体个数为9-11个，甘蓝型油菜气孔保卫细胞周长大于75.83um，叶绿体个数为19-20个；待鉴定材料测定10个以上气孔同时满足保卫细胞周长在58.90-75.83um范围内，且叶绿体数在14-16个则判定此植株为白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种F1，否则为假杂种。

主权项

1.一种白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种鉴定的方法，其特征在于包括以下步骤：（1）1%碘-碘化钾染色液的配置；（2）在幼苗期采摘白菜型油菜、甘蓝型油菜以及白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种F1第4-7叶位处的平展叶片,装入塑料袋中，在5-10min内放入准备好的0°C以下冰盒中，带回，叶片经蒸馏水清洗后，置于通风橱中吹干叶片表面水分，用刀片切叶片下面部位，用镊子撕取下表皮气孔,放在载玻片上，使其平展开，滴1滴1%碘-碘化钾染色液，染色30～60秒，压片；（3）将步骤（2）制好的玻片在光学显微镜下用测微尺测出气孔保卫细胞横径A、纵径B值，并作以记录；同时观察计数叶表皮气孔保卫细胞内的叶绿体数；每张叶片观察14-16个气孔，以4-5张叶片的平均值作为该品种的保卫细胞叶绿体数值；（4）用椭圆模型近似公式计算出保卫细胞周长，式中：L为保卫细胞周长，A为保卫细胞横径，B为保卫细胞纵径；（5）用气孔保卫细胞周长及叶绿体数量分界域值来判定种间杂种真伪：以其亲本作为对照，若每片叶有10个以上气孔同时满足保卫细胞周长介于58.90um～75.83um，叶绿体个数为14～16个者，判定该植株为白菜型油菜与甘蓝型油菜种间杂种F1。