[发明专利]青天葵球茎组培快速繁殖方法

摘要

本发明提供一种青天葵球茎组培快速繁殖方法，涉及生物工程技术领域，本发明通过下述方案得以实现：以青天葵球茎为外植体，经消毒处理后，对球茎进行萌发培养，通过培养获得根状茎；然后对根状茎进行增殖培养，形成大量根状茎；再对根状茎进行球茎诱导培养，可以形成大量球茎种源，该方法可以提高青天葵的球茎繁殖速度和增殖倍数，有利于青天葵球茎工厂化生产。

主权项

一种青天葵球茎组培快速繁殖方法，其特征是：以青天葵球茎为外植体，经消毒处理后，对球茎进行萌发培养，通过培养获得根状茎；然后对根状茎进行增殖培养，形成大量根状茎；再对根状茎进行球茎诱导培养，可以形成大量球茎种源；具体步骤如下：(1)外植体选取与消毒：选取生长健壮无病虫的球茎，先用洗衣粉浸泡，用牙刷将球茎上的泥土洗刷干净，然后用75％的酒精浸泡30s后置于0.1％的升汞溶液中消毒10～15min，再用无菌水冲洗5～6次；(2)萌发培养：将球茎接种到萌发培养基上，萌发培养基为MS+BA2.0～4.0毫克/升+NAA0.5～1.0毫克/升+KT0.5～1.0毫克+LH(水解乳蛋白)1.0克/升+蔗糖30克/升，萌发培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间30～45天，诱导出根状茎；(3)根状茎增殖培养：将根状茎接种到增殖培养基上，增殖培养基为MS+BA2.0～4.0毫克/升+NAA2.0～4.0毫克/升+GA3 2.0～4.0毫克/升+10～20％椰子汁+蔗糖30克/升，增殖培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，光照强度1500～2000Lx，每天光照12小时，培养时间30～45天，获得大量根状茎；(4)球茎诱导培养：将根状茎接种到诱导培养基上，诱导培养基为1/2MS+BA0.1～0.5毫克+NAA0.1～0.5毫克/升+10～20％椰子汁+0.1％炭，增殖培养基pH5.8～6.2，培养温度25～27℃，黑暗培养，培养时间50～60天，获得大量球茎种源。