[发明专利]利用FOXP3为标记物分选Treg细胞的方法无效
| 申请号： | 201210268148.4 | 申请日： | 2012-07-31 |
| 公开（公告）号： | CN102766597A | 公开（公告）日： | 2012-11-07 |
| 发明（设计）人： | 田易;倪兵;吴玉章 | 申请（专利权）人： | 中国人民解放军第三军医大学 |
| 主分类号： | C12N5/0783 | 分类号： | C12N5/0783 |
| 代理公司： | 北京同恒源知识产权代理有限公司 11275 | 代理人： | 赵荣之 |
| 地址： | 400038 重*** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 本发明公开了利用FOXP3为标记物分选Treg细胞的方法，具体为，收集外周血单核细胞，用PBS液重悬，然后加入细胞表面标记物CD4抗体和CD25抗体，在温度为10-28℃条件下孵育；然后用PBS洗涤，离心收集细胞，得洗涤细胞；将所得洗涤细胞中加入FOXP3固定破膜剂洗涤，再用FOXP3破膜剂重悬细胞，避光孵育，离心收集沉淀；然后用FOXP3破膜剂重悬细胞；再加入荧光标记的FOXP3抗体，室温避光反应，最后加入细胞染色液重悬细胞，上流式细胞仪进行分选，本发明公开的分选方法，其灵敏度高，分选的Treg细胞纯度高，其纯度大于99.0%。 | ||
| 搜索关键词： | 利用 foxp3 标记 分选 treg 细胞 方法 | ||
【主权项】：
利用FOXP3为标记物分选Treg细胞的方法，其特征在于，具体步骤为：A.收集外周血单核细胞，用PBS液重悬，然后加入细胞表面标记物CD4抗体和CD25抗体，在温度为10‑28℃条件下孵育；然后用PBS洗涤，离心收集细胞，得洗涤细胞；B.将步骤A所得洗涤细胞中加入FOXP3固定破膜剂洗涤，然后用FOXP3固定破膜剂重悬细胞，避光孵育，离心收集沉淀；然后用FOXP3固定破膜剂重悬细胞；然后加入荧光标记的FOXP3抗体，室温避光反应，得FOXP3抗体标记的细胞；C.将步骤B所得FOXP3抗体标记的细胞加入细胞染色液重悬细胞，上流式细胞仪进行分选。
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