[发明专利]重组小鼠EPS8肿瘤疫苗及其制备方法和应用

摘要

本发明公开了一种重组小鼠EPS8肿瘤疫苗，本发明还公开了该疫苗的制备方法，包括如下步骤：重组小鼠rmHis-Eps8基因的克隆及原核表达载体的构建：采用RT-PCR方法获得Eps8第一个胞外区第440位氨基酸至第710位氨基酸的基因片段，插入pET28a原核表达载体，转入大肠杆菌BL21，在大肠杆菌中获得高效表达，经纯化和超滤柱浓缩蛋白后得到。所得疫苗能够延长4T1荷瘤小鼠的生存时间，抑制小鼠体内4T1乳腺癌细胞的增殖，为临床上对于难治复发性恶性肿瘤的治疗提供新的策略。

主权项

一种重组小鼠EPS8肿瘤疫苗，其特征在于含有如下氨基酸序列的蛋白质：Pro Pro Met Leu Asn Phe Met Gly Ala Pro Thr Glu Gln Asp Met Tyr1               5                   10                  15Gln Leu Ala Glu Ser Val Ala Asn Ala Glu His Gln Arg Lys Gln Asp            20                  25                  30Ser Lys Arg Leu Ser Thr Glu His Ser Asn Val Ser Asp Tyr Pro Pro        35                  40                  45Ala Asp Gly Tyr Ala Tyr Ser Ser Ser Met Tyr His Arg Gly Pro His    50                  55                  60Ala Asp His Gly Glu Ala Ala Met Pro Phe Lys Ser Thr Pro Asn His65                  70                  75                  80Gln Val Asp Arg Asn Tyr Asp Ala Val Lys Thr Gln Pro Lys Lys Tyr                85                  90                  95Ala Lys Ser Lys Tyr Asp Phe Val Ala Arg Asn Ser Ser Glu Leu Ser            100                 105                 110Val Met Lys Asp Asp Val Leu Glu Ile Leu Asp Asp Arg Arg Gln Trp        115                 120                 125Trp Lys Val Arg Asn Ala Ser Gly Asp Ser Gly Phe Val Pro Asn Asn    130                 135                 140Ile Leu Asp Ile Met Arg Thr Pro Glu Ser Gly Val Gly Arg Ala Asp145                 150                 155                 160Pro Pro Tyr Thr His Thr Ile Gln Lys Gln Arg Thr Glu Tyr Gly Leu                165                 170                 175Arg Ser Ala Asp Thr Pro Ser Ala Pro Ser Pro Pro Pro Thr Pro Ala            180                 185                 190Pro Val Pro Val Pro Leu Pro Pro Ser Val Pro Ala Pro Val Ser Val        195                 200                 205Pro Lys Val Pro Ala Asp Val Thr Arg Gln Asn Ser Ser Ser Ser Asp    210                 215                 220Ser Gly Gly Ser Ile Val Arg Asp Ser Gln Arg Tyr Lys Gln Leu Pro225                 230                 235                 240Val Asp Arg Arg Lys Ser Gln Met Glu Glu Val Gln Asp Glu Leu Phe                245                 250                 255Gln Arg Leu Thr Ile Gly Arg Ser Ala Ala Gln Arg Lys Phe His。            260                 265                 270