[发明专利]青霉基因工程菌的制备方法及青霉基因工程菌的应用有效
| 申请号： | 201210277964.1 | 申请日： | 2012-08-07 |
| 公开（公告）号： | CN103571861A | 公开（公告）日： | 2014-02-12 |
| 发明（设计）人： | 张田;王剑英;唐克轩;林智 | 申请（专利权）人： | 深圳市绿微康生物工程有限公司 |
| 主分类号： | C12N15/55 | 分类号： | C12N15/55;C12N15/63;C12N1/15;C12N9/20;C12R1/80 |
| 代理公司： | 深圳市万商天勤知识产权事务所(普通合伙) 44279 | 代理人： | 王志明 |
| 地址： | 518000 广东省深圳*** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种青霉基因工程菌的制备方法及青霉基因工程菌的应用，所述方法为：获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；分别克隆青霉脂肪酶基因PEL、扩展青霉甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子PgpdP和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC，得到有强启动子驱动的PEL基因表达盒；将PEL基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记PEL基因超表达载体；将该超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将PEL基因表达盒转化到青霉菌株中，得到青霉基因工程菌。本发明获得的青霉工程菌产脂肪酶能力强，青霉工程菌制备的脂肪酶酶活比出发菌青霉野生菌提高了100％～150％。 | ||
| 搜索关键词： | 青霉 基因工程 制备 方法 应用 | ||
【主权项】：
一种青霉基因工程菌的制备方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：(1)获得潮霉素抗性表达盒并克隆到目标质粒上，获得潮霉素抗性的重组质粒；(2)分别克隆青霉脂肪酶基因PEL、扩展青霉甘油醛‑3‑磷酸脱氢酶启动子PgpdP和构巢曲霉色氨酸合成酶终止子TtrpC，得到有强启动子驱动的PEL基因表达盒；(3)将所述PEL基因表达盒克隆到潮霉素抗性的重组质粒中，获得含潮霉素筛选标记PEL基因超表达载体；(4)将含潮霉素筛选标记PEL基因超表达载体转化工程农杆菌，利用农杆菌介导转化法将PEI基因表达盒转化到青霉菌株中，得到所述的青霉基因工程菌。
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