[发明专利]刺糖多孢菌染色体的基因整合有效
申请号: | 201210284307.X | 申请日: | 2012-05-03 |
公开(公告)号: | CN102816783A | 公开(公告)日: | 2012-12-12 |
发明(设计)人: | 韩蕾;N·芒西 | 申请(专利权)人: | 陶氏益农公司 |
主分类号: | C12N15/63 | 分类号: | C12N15/63;C12N1/15;C12P21/00;C12P19/62;C12R1/645 |
代理公司: | 北京市柳沈律师事务所 11105 | 代理人: | 吴培善 |
地址: | 美国印*** | 国省代码: | 美国;US |
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摘要: | 本发明包括在刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)基因组中鉴定和确认中性多核苷酸整合位点的方法。此外,本发明包括中性位点的用途和用于整合在后续世代中稳定维持和表达的包含基因表达盒的多核苷酸的方法。本发明包括可被破坏而对多杀菌素产生、生长、或其他期望的代谢特征没有负面影响的中性整合位点。 | ||
搜索关键词: | 刺糖多孢菌 染色体 基因 整合 | ||
【主权项】:
一种用于将基因整合入刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)菌种菌株的染色体DNA的方法,包括步骤:创建噬菌体文库以鉴定基因组基因座;从基因组基因座克隆两个基因组DNA片段,其中将一个基因组片段克隆至多核苷酸的待整合基因的上游,并且将第二基因组片段克隆至所述多核苷酸的待整合基因的下游,并且所得的连接的DNA片段成为整合质粒;通过转化方法将步骤(b)的质粒引入刺糖多孢菌菌株;获得转化接合子;并,筛选存在所述多核苷酸的所述转化接合子。
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