[发明专利]一种黄精的组织培养方法

摘要

本发明公开了一种黄精的组织培养方法，对当年生地下茎上的幼芽进行丛生芽诱导、生根培养、炼苗后进行移栽；对当年生带有隐藏芽点的块茎部分进行愈伤组织培养、增殖培养、生根培养、炼苗后进行移栽，通过该方法可以对黄精进行快速繁殖，并实现大面积工业化种植，以解决野生地藏黄精产量低、供应少和自然栽培周期长的问题。

主权项

一种黄精的组织培养方法，其特征在于该方法按如下步骤进行：（1）外植体的选择与灭菌选择当年生地下茎上的幼芽或当年生带有隐藏芽点的的块茎部分，所述块茎将其切成小块，且每块都带有至少一个隐藏的芽点；将所述幼芽或块茎用自来水快速冲去泥沙，并用洗涤剂液浸泡30min以除去表面污垢，然后自来水冲洗3h，再置于超净工作台用体积浓度75%酒精灭菌15s，无菌水冲洗3遍，再将其放入体积浓度0.2%Hgcl2溶液中浸泡12‑14min，所述Hgcl2溶液中含有体积浓度0.15%‑02%的吐温20，之后无菌水冲洗5遍，转入培养皿中吸干水分，等待接入培养基；（2）幼芽丛生芽的诱导、块茎丛生芽愈伤组织培养和增殖培养A、将经过步骤（1）处理的幼芽转入丛生芽诱导培养基中，所述丛生芽诱导培养基的配方为：MS+6‑BA 4.0mg/L+NAA0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5.8；培养条件为温度：23±1℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为10‑12小时/天，培养时间为20‑30天；然后直接转入生根培养；B、①将经过步骤（1）处理的带有隐藏芽点的的块茎接种MS+6‑BA 4.0mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5.8培养基上，23±1℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为10‑12小时/天，培养时间为20‑30天；中间剔除污染的块茎外植体；②在块茎组织分化形成愈伤组织后，将诱导出的的愈伤组织转入培养基为：MS+6‑BA 3.0mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH 5.8；培养条件为温度23±1℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为10‑12小时/天，培养时间为10‑20天；愈伤组织进行增殖，然后将增殖后的愈伤组织切成1.0cm*1.0cm*1.0cm大小，再转入原先的诱导培养基MS+6‑BA 4.0mg/L+NAA 0.2mg/L+琼脂7g/L+蔗糖30g/L，pH=5.8培养基上，23±1℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为10‑12小时/天，培养时间为15‑25天；（3）生根的培养将经过步骤（2）处理的外植体转入生根培养基中培养，所述生根培养基的配方为：1/2‑1/3MS、NAA 0.2‑0.5mg/L、琼脂6‑8g/L、蔗糖20‑30g/L；培养条件为温度23±1℃、光照1500‑2000Lx；光照时间为10‑12小时/天，培养时间为35‑50天；（4）炼苗和移栽将经过炼苗的黄精根茎从接种瓶中取出，用清水洗掉培养基，在质量浓度0.1%高锰酸钾溶液中消毒1min，用清水冲洗干净后，假植在腐殖质土：沙子=1:1（v：v）的基质上，保持 空气湿度95%以上，用遮阳网遮荫；根据成苗的时间安排栽植，在春季以后成苗则选择秋栽即9‑10月下旬，在春季之前成苗则选择春栽即3月下旬，将假植的黄精根茎栽种到整好的露地畦内，将根茎段芽眼向上，每隔10～15cm平放1个根茎，行距20～25cm，覆土4～6cm，浇足水；在土壤封冻前，畦面上盖一层有机肥或薄膜，以利保暖越冬。