[发明专利]一种在小鼠胚胎细胞中基因定点突变的构建方法无效
| 申请号： | 201210291002.1 | 申请日： | 2012-08-15 |
| 公开（公告）号： | CN102839156A | 公开（公告）日： | 2012-12-26 |
| 发明（设计）人： | 李大力;邱中伟;刘明耀 | 申请（专利权）人： | 华东师范大学 |
| 主分类号： | C12N5/10 | 分类号： | C12N5/10;C12N15/89;A01K67/027 |
| 代理公司： | 上海麦其知识产权代理事务所(普通合伙) 31257 | 代理人： | 董红曼 |
| 地址： | 200062 上*** | 国省代码： | 上海;31 |
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| 摘要： | 本发明公开一种在小鼠胚胎细胞中基因定点突变的构建方法，通过在小鼠胚胎细胞中引入特定核算序列构建基因定点突变小鼠，包括以下步骤：在小鼠目标基因组序列中确定目标靶序列；按所述目标靶序列的顺序，构建能够识别并切割目标基因的TALEN核酸序列；将所述TALEN核酸序列导入小鼠胚胎细胞内；所获得的小鼠胚胎细胞用于体外培养或直接植入母鼠，表达TALEN并切割目标基因组，从而筛选目标基因突变的小鼠。本发明具有无需构建同源重组打靶载体、无需进行ES打靶细胞筛选，突变体比例高，操作简便，实验成本和周期大大减少等优点。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 小鼠 胚胎 细胞 基因 定点 突变 构建 方法 | ||
【主权项】：
一种在小鼠胚胎细胞中基因定点突变的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)在小鼠目标基因组序列中确定目标靶序列；(2)按所述目标靶序列的顺序，构建能够识别并切割目标基因的TALEN核酸序列；(3)将所述TALEN核酸序列导入小鼠胚胎细胞内；所获得的小鼠胚胎细胞用于体外培养或直接植入母鼠，表达TALEN并切割目标基因组，从而筛选目标基因突变的小鼠。
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