[发明专利]一种聚乙二醇选择性修饰蛋白C端羧基的方法在审
| 申请号： | 201210300769.6 | 申请日： | 2012-08-22 |
| 公开（公告）号： | CN103626831A | 公开（公告）日： | 2014-03-12 |
| 发明（设计）人： | 胡涛;王俊;苏志国;马光辉;安红波 | 申请（专利权）人： | 中国科学院过程工程研究所 |
| 主分类号： | C07K1/107 | 分类号： | C07K1/107;C12N9/96;C12N9/48 |
| 代理公司： | 暂无信息 | 代理人： | 暂无信息 |
| 地址： | 100190 *** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | 发明涉及一种聚乙二醇(PEG)修饰方法。该方法可以选择性修饰蛋白质和多肽C端的羧基，而且每个蛋白质和多肽分子上仅连接了1个PEG分子。该方法所使用的模型蛋白是葡激酶。PEG修饰的主要步骤为：(1)在偏酸性条件下(pH 5.0)，将葡激酶的羧基与胱胺(cystamine)的氨基用碳二亚胺(EDC)进行连接；(2)胱胺所携带的二硫键经还原剂还原后，生成的巯基与单甲氧基PEG-马来酰亚胺(mPEG-Mal)反应。葡激酶C端羧基的pKa值为2.1-2.4，而天冬氨酸与谷氨酸侧链羧基的pKa值分别为3.7-4.0和4.2-4.5。因此，在pH 5.0的条件下PEG可选择性修饰葡激酶的C端羧基。本发明主要用于蛋白质或多肽C端羧基的PEG选择性修饰反应，提供了一种新的PEG修饰方法，其优点在于PEG修饰产物的修饰位点均一性好。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 聚乙二醇 选择性 修饰 蛋白 羧基 方法 | ||
【主权项】：
一种聚乙二醇选择性修饰蛋白质和多肽的C末端羧基的方法，主要步骤为：在2‑200mM的2‑(N‑吗啡啉)乙磺酸pH 4.5‑8.0的缓冲液体系中，将蛋白质或多肽的羧基与胱胺的氨基用碳二亚胺进行交联反应，其中蛋白质或多肽：胱胺：碳二亚胺的比例为1:5‑10:2‑50，胱胺所携带的二硫键经三(2‑羧乙基)膦还原后，生成的巯基与单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺反应，从而实现蛋白质和多肽C末端羧基的PEG选择性修饰。
下载完整专利技术内容需要扣除积分，VIP会员可以免费下载。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于中国科学院过程工程研究所，未经中国科学院过程工程研究所许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/patent/201210300769.6/，转载请声明来源钻瓜专利网。
- 上一篇：树脂组合物、以及使用其的预浸料和覆金属箔层压板
- 下一篇：变焦镜头和成像设备
