[发明专利]两种拟青霉属真菌对三七的生物转化

摘要

发明涉及两种拟青霉属真菌对三七药材进行生物转化的方法。该方法的操作步骤主要包括：（1）蝙蝠蛾拟青霉（Paecilomyce shepiali Chen & Dai）和蛹草拟青霉（Paecilomyces militaris Liang）菌种的制备；（2）三七培养基的制备；（3）发酵培养条件；（4）产物后处理和主要功效成分检测。使用本发明所提出的蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉发酵三七的方法，直接以三七原药材作为发酵底物，通过一次发酵过程同时获得三七和药用虫草真菌的药用成分，使培养物兼具三七和药用真菌的双重功效。

主权项

两种拟青霉属真菌对三七药材进行生物转化的方法，其特征在于该方法包括：（1）生产菌株为蝙蝠蛾拟青霉Paecilomyces hepiali Chen & Dai和蛹草拟青霉Paecilomyces militaris Liang；（2） 菌种制备：将蝙蝠蛾拟青霉和蛹草拟青霉分别接种到PPDA斜面培养基，于26℃恒温培养7天；（3）三七培养基：精确称取1 g过60目筛的三七粉于100 mL三角瓶，加入0.2 mL无机盐：10 %KH2PO4和5 %MgSO4，20 mL水，自然pH，121℃灭菌30 min；（4） 液体发酵培养：将制备好的菌种接入三七培养基中，于10‑30℃，120 r/min培养4‑16 d；（5） 液体发酵物后处理：将培养好的液体发酵物抽滤，用10 mL纯水清洗滤渣，合并滤液，4000 r/min离心30 min，上清液加入纯水定容至30 mL为上清处理液，取10 mL上清处理液加入等体积水饱和正丁醇超声萃取1 h，静置分层后，收集上层正丁醇相60℃旋蒸至干燥，用5 mL70%甲醇溶解，采用HPLC法检测其皂苷含量，取20 mL上清处理液烘干，取0.1 g该烘干样品加入1 mL 20%甲醇溶解，采用HPLC法检测其虫草素和虫草腺苷含量。