[发明专利]特异性沉默鸡马立克氏病病毒gI、gE基因的siRNA序列及其载体和应用无效

专利信息
申请号: 201210303835.5 申请日: 2011-03-23
公开(公告)号: CN102851292A 公开(公告)日: 2013-01-02
发明(设计)人: 王云峰;赵妍;石星明;崔红玉;刘长军;王玫 申请(专利权)人: 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所
主分类号: C12N15/113 分类号: C12N15/113;C12N15/63;C12N15/85;A61K48/00;A61P31/22
代理公司: 中科专利商标代理有限责任公司 11021 代理人: 王旭
地址: 150001 黑龙*** 国省代码: 黑龙江;23
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摘要: 发明提供了一种能有效地特异性沉默鸡马立克氏病病毒(MDV)gI和gE的siRNA序列及其载体和在MDV基因治疗和制备基因工程疫苗中的应用。本发明使用http//www.ambion.com的靶位点筛选和设计工具,通过一步法PCR扩增含有禽源U6启动子的siRNA表达盒用于快速筛选出MDV gI和gE基因的干扰序列。根据siRNA对应的起始位点在gI和gE基因mRNA序列上的位置,分别命名为sigI735和sigE936。构建分别含有干扰序列的siRNA真核表达载体,提取纯化的质粒转染CEF细胞,可有效抑制MDV gI和gE基因的表达,并利用DF1、Vero、MDCK稳定细胞系进一步检测干扰序列抑制MDV gI和gE基因表达的效果。
搜索关键词: 特异性 沉默 鸡马立克氏病 病毒 gi ge 基因 sirna 序列 及其 载体 应用
【主权项】:
一种特异性干扰鸡马立克氏病病毒gE基因的siRNA序列,其特征在于所述siRNA序列为:sigE936:正义链5′AGATGTCCAGGTAGACGAT 3′;(SEQ ID NO:2)         反义链5′ATCGTCTACCTGGACATCT 3′。(SEQ ID NO:4)
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