[发明专利]一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法无效
申请号: | 201210308914.5 | 申请日: | 2012-08-28 |
公开(公告)号: | CN102776175A | 公开(公告)日: | 2012-11-14 |
发明(设计)人: | 王帅;郑立;李林 | 申请(专利权)人: | 国家海洋局第一海洋研究所 |
主分类号: | C12N15/10 | 分类号: | C12N15/10 |
代理公司: | 青岛海昊知识产权事务所有限公司 37201 | 代理人: | 张中南;曾庆国 |
地址: | 266061 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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摘要: | 本发明涉及一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法,其步骤如下:将液氮研磨后的微藻样品加入到温度为60-65℃的十六烷基三甲基溴化铵和β-巯基乙醇的混合提取液中,再在60-65℃加热;加热结束后再加入氯仿、异戊醇混合液,混合后离心;取上清液后再次加入氯仿、异戊醇混合液;混合后离心;取上清液后加入LiCl,混均后放入-80℃条件下沉淀,再离心去除上清液,将沉淀用75%的乙醇洗涤1-2次,待乙醇挥发完全后加入DEPC水溶解完成提取;其中β-巯基乙醇是在使用的时候才与十六烷基三甲基溴化铵混合制成混合提取液。本发明克服了海洋微藻含盐量高和所含糖类物质较多对提取植物RNA的影响,较市场上的植物RNA提取试剂盒提取效果更好,不出现杂带,操作步骤简便、快速、效果好。 | ||
搜索关键词: | 一种 有效 快速 提取 海洋 rna 方法 | ||
【主权项】:
一种有效快速提取海洋微藻RNA的方法,其步骤如下:将液氮研磨后的微藻样品加入到温度为60‑65℃的十六烷基三甲基溴化铵和β‑巯基乙醇的混合提取液中,再在60‑65℃加热;加热结束后再加入氯仿、异戊醇混合液,混合后离心;取上清液后再次加入氯仿、异戊醇混合液;混合后离心;取上清液后加入LiCl,混均后放入‑80℃条件下沉淀,再离心去除上清液,将沉淀用75%的乙醇洗涤1‑2次,待乙醇挥发完全后加入DEPC水溶解完成提取;其中β‑巯基乙醇是在使用的时候才与十六烷基三甲基溴化铵混合制成混合提取液。
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