[发明专利]一种维生素B2的酶联免疫检测试剂盒

摘要

一种维生素B2的酶联免疫检测试剂盒。属于酶联免疫吸附分析技术领域。本发明试剂盒中的试剂包括：包被有包被抗原即维生素B2与载体蛋白偶联物的酶标板，维生素B2标准溶液，酶标羊抗兔抗体溶液，维生素B2抗体溶液，发光溶液，洗涤溶液，包被溶液和封闭溶液。偶联物的载体蛋白为分子量范围在6.7KDa-6.8KDa的牛血清蛋白或卵清蛋白。包被酶标板的包被抗原由维生素B2与卵清蛋白偶联制成，制备抗体的人工免疫原由维生素B2与牛血清蛋白偶联制成。试剂盒对维生素B2的最大检测范围为1ng/mL~80ng/mL。本发明的酶联免疫检测试剂盒具有简单、快捷、准确、灵敏度高的特点，可在婴幼儿食品(如奶粉)、功能饮料及动物饲料中维生素B2的添加量检测中发挥重要作用。

主权项

一种维生素B2的酶联免疫检测试剂盒，其特征是该试剂盒中试剂的组成包括：A、各孔包被有包被抗原即维生素B2与载体蛋白的偶联物的酶标板1块；B、维生素B2标准溶液：1ng/mL，5ng/mL，10ng/mL，25ng/mL，50ng/mL，80ng/mL各1瓶；C、酶标羊抗兔抗体溶液：辣根过氧化酶一羊抗兔IgG原液，使用时用洗涤溶液稀释成1：2000的工作浓度；D、维生素B2抗体溶液：人工免疫抗原免疫动物制备所得的维生素B2多克隆抗体原液，使用时用洗涤溶液稀释成1：2000工作浓度；E、发光溶液：使用400μL四甲基联苯胺(TMB)溶液、10mL pH=5.0的柠檬酸缓冲液和2μL体积百分比为30%的H2O2溶液混合而成的显色底物溶液，其中四甲基联苯胺(TMB)溶液由10mg TMB+2mL DMSO混合而成；F、洗涤溶液：为pH=7.5、浓度为0.1mol/L的磷酸盐缓冲液，其中含有吐温‑20的体积分数为0.05%；G、包被溶液：1.59g碳酸钠和2.53g碳酸氢钠溶于1L水中制成的溶液，调节pH=9.5；H、封闭溶液：10g卵清蛋白（OVA）溶于1L以上F中所述的洗涤溶液中，再加入质量分数0.05%的NaN3水溶液制成。