[发明专利]利用旋转组合模具制备纺锤状复杂器官前体的方法

摘要

利用旋转组合模具制备纺锤状复杂器官前体的方法，该方法首先制备细胞基质溶液和合成高分子溶液，组装带有多级分支内模具的组合模具，将细胞基质溶液灌注到内环模具与底座模具之间，旋转底座模具并经物理或化学交联或聚合形成细胞基质层；将合成高分子溶液灌注到细胞基质层和外环模具之间，旋转底座模具并用细胞培养液或PBS萃取后形成外支架，去除组合模具形成含不同细胞与合成高分子支架的具有多分支通道的半纺锤状三维结构，将两个半纺锤体通过天然或合成高分子溶液渗透粘连合并形成具有内分支管道的完整纺锤状复杂器官前体,克服了目前细胞很难渗入到三维支架中、含多种细胞的支架成形不易等缺点。

主权项

利用旋转组合模具制备纺锤状复杂器官前体的方法，其特征在于该方法包括如下步骤进行：1）将不同天然高分子溶液与不同动物体细胞悬浮液分别按1～9：9～1体积比混合制成多种细胞基质溶液；天然高分子溶液的质量百分浓度为1％～30％；2）将内模具(1)底部插入阵列孔板(2)的孔洞中，阵列孔板(2)镶嵌在底座模具(3)底层，底座模具(3)采用从下至上的多层台阶结构，内模具(1)采用多级分支结构，且各级内环模具(4)厚度与底座模具(3)对应的台阶宽度相同；先将第一级内环模具(4a)套在底座模具(3)的第一级台阶上，之后将其中一种细胞基质溶液灌注到内模具(1)和第一级内环模具(4a)之间的缝隙中，使底座模具(3)、内模具(1)和阵列孔板(2)一起旋转并使第一级内环模具(4a)保持不动，使细胞基质溶液形成半纺锤状外形，旋转过程中采用物理或化学交联或聚合方法，使细胞基质溶液中的天然高分子交联，去除第一级内环模具(4a)，形成稳定的第一层细胞基质层(5a)；3）将第二级内环模具(4b)套在底座模具(3)的第二级台阶上，将另一种细胞基质溶液灌注到第一层细胞基质层(5a)和第二级内环模具(4b)之间的缝隙中，使底座模具(3)、内模具(1)和阵列孔板(2)一起旋转并使第二级内环模具(4b)保持不动，使细胞基质溶液形成半纺锤状外形，旋转过程中采用物理或化学交联或聚合方法，使细胞基质溶液中的天然高分子交联，去除第二级内环模具(4b)，形成稳定的第二层细胞基质层(5b)；4）重复步骤2）与步骤3），得到含不同动物体细胞的多层细胞基质层结构；5）将合成高分子材料溶于有机溶剂中制成质量百分浓度为5％～30％的合成高分子溶液；6）将外环模具(6)套在底座模具(3)的最外级台阶上，将合成高分子溶液灌入步骤4）中得到的多层细胞基质层结构与外环模具(6)的缝隙中，使底座模具(3)、内模具(1)和阵列孔板(2)一起旋转并使外环模具(6)保持不动，使合成高分子溶液形成半纺锤状外形，旋转过程中用细胞培养液或PBS萃取合成高分子溶液中的溶剂，形成外层合成高分子材料层(7)，然后依次去除外环模具(6)、底座模具(3)和内模具(1)，制成含多分支通道的半纺锤状复杂器官前体；7)将两个半纺锤体通过天然或合成高分子溶液渗透粘连合并在一起，形成具有内分支管道的完整纺锤状复杂器官前体。