[发明专利]一种疏水性多肽修饰抗体的合成方法在审
申请号: | 201210333076.7 | 申请日: | 2012-09-11 |
公开(公告)号: | CN103665095A | 公开(公告)日: | 2014-03-26 |
发明(设计)人: | 高志贤;周焕英;刘忠文;张亦红;刘飞;陈风春;刘芳;苏璇 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军军事医学科学院卫生学环境医学研究所 |
主分类号: | C07K1/107 | 分类号: | C07K1/107 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 300050*** | 国省代码: | 天津;12 |
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摘要: | 本发明的目的是针对水溶性抗体不能在BLM表面自动镶嵌,无法实现BLM表面功能模拟的问题,提供一种疏水性多肽修饰抗体的合成方法,实现疏水性多肽修饰后的抗体在BLM的自动镶嵌。反应采用活性酯法,EDC活化多肽羧基形成酰胺键,NHS取代EDC活化酯而形成NHS活化酯,之后与抗体上的氨基结合,实现疏水性多肽在抗体上的修饰。 | ||
搜索关键词: | 一种 疏水 多肽 修饰 抗体 合成 方法 | ||
【主权项】:
一种疏水性多肽修饰抗体的合成方法,具体涉及一种采用疏水性多肽RRRRRRRR或AC‑FAAAVLAAPIL修饰雌二醇抗体的合成方法,其特征在于包括以下合成步骤:(1)配制20‑150mg/mL的疏水性多肽溶液,溶剂为10‑30%的甲醇。(2)按照多肽:NHS:EDC摩尔质量为1∶2∶2‑5的比例向多肽溶液中依次加入N‑羟基丁二酰亚胺(NHS)和1‑乙基‑(3‑二甲基氨基丙基)碳酰二亚胺盐酸盐(EDC·HCl),充分溶解后,800‑1000转/分钟避光震荡反应15‑30分钟,得到活化后的多肽溶液。(3)按照活化后的多肽和抗体30‑40∶1的摩尔质量比,将活化后的多肽溶液逐滴加于3‑6倍体积的抗体磷酸盐缓冲溶液(PBS)中,4℃避光反应8‑12小时。(4)超滤离心去处未结合的多肽。(5)将超滤管中剩余液体用适量的PBS重新定容,从超滤管吸出,冰箱4℃保存备用。
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