[发明专利]一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法有效
| 申请号： | 201210333887.7 | 申请日： | 2012-09-11 |
| 公开（公告）号： | CN103074309A | 公开（公告）日： | 2013-05-01 |
| 发明（设计）人： | 鞠建松;徐书景;赵宝华;何广正;李兵杰 | 申请（专利权）人： | 河北师范大学 |
| 主分类号： | C12N9/06 | 分类号： | C12N9/06;C12N15/53;C12N15/70;C12R1/19;C12R1/07 |
| 代理公司： | 石家庄新世纪专利商标事务所有限公司 13100 | 代理人： | 董金国 |
| 地址： | 050024 河*** | 国省代码： | 河北;13 |
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| 摘要： | 本发明公开了一种L-丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白及其制备方法。根据同源序列二级结构比对结果，将假坚强芽孢杆菌(Bacilluspseudofirmus)的L-丙氨酸脱氢酶活性中心附近73位赖氨酸通过PCR定点突变为丙氨酸，构建突变体表达载体，通过原核表达及Ni-NTA亲和层析技术纯化得到突变体酶K73A。所获得的突变体酶K73A之比活力是野生型的202%，而其他酶学性质没有变化。突变体酶蛋白对底物L-丙氨酸的转换数Kcat为376.7min-1，对β-NAD+的转换数Kcat为290.1min-1，分别是野生型的2.0和2.1倍。可用于改善生物法生产丙酮酸及L/D-丙氨酸等的生产工艺。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 丙氨酸 脱氢酶 突变体 蛋白 及其 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种L‑丙氨酸脱氢酶的突变体酶蛋白，其特征在于其氨基酸序列如SEQ ID No.1所示。
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