[发明专利]家蚕去细胞血淋巴液的制备方法无效
| 申请号： | 201210360170.1 | 申请日： | 2012-09-25 |
| 公开（公告）号： | CN102827803A | 公开（公告）日： | 2012-12-19 |
| 发明（设计）人： | 朱勇;赵诏;徐水;周婵;肖欢 | 申请（专利权）人： | 西南大学 |
| 主分类号： | C12N5/07 | 分类号： | C12N5/07 |
| 代理公司： | 重庆弘旭专利代理有限责任公司 50209 | 代理人： | 周韶红 |
| 地址： | 400716 *** | 国省代码： | 重庆;85 |
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| 摘要： | 一种家蚕去细胞血淋巴液的制备方法，通过家蚕体表消毒、家蚕血淋巴液的制备、抗氧化处理、去细胞处理、除菌处理等一系列步骤实现。本发明以家蚕血淋巴液为材料制备一种应用于昆虫细胞培养的营养物质。通过维生素C抑制血淋巴液中酪氨酸氧化酶的活性，使血淋巴液在与外界接触时不会氧化变黑，其中的主要营养物质成分及含量不会发生变化，也不会影响细胞培养。与血清相比，家蚕血淋巴液更适合昆虫的细胞培养，而且价格低廉。 | ||
| 搜索关键词： | 家蚕 细胞 淋巴液 制备 方法 | ||
【主权项】：
一种家蚕去细胞血淋巴液的制备方法，其特征在于依次通过下列步骤实现：(1)取2‑3龄眠期家蚕，置于质量百分比浓度为2%的次氯酸钠溶液中进行体表消毒5min，再用体积比浓度为75%的乙醇消毒5min，用无菌水冲洗干净后，将家蚕放置在无菌吸水纸上吸干水分；(2)将家蚕用无菌针头刺破腹足取血，获得家蚕血淋巴液；(3)在获得的家蚕血淋巴液中按10‑20g/L加入维生素C;(4) 4℃下以12000g离心20min，取离心后上清液, 4℃、PBS缓冲液中透析24小时,然后更换PBS缓冲液，再重复两次;PBS缓冲液: 0.01mol/L, pH值6.2，渗透压320 mOsm/kg(5)将上清液分别通过0.45μm、0.22μm和0.1μm孔径的一次性针头过滤器过滤除菌, 真空密封包装即得家蚕去细胞血淋巴液。
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