[发明专利]利用重组枯草芽孢杆菌高效表达Staphyloccocus aureus α-乙酰乳酸脱羧酶

摘要

本发明涉及一种利用重组枯草芽孢杆菌高效表达Staphyloccocusaureusα-乙酰乳酸脱羧酶，以金黄色葡萄球菌(Staphyloccocus aureus)基因组DNA为模板，扩增得到编码α-乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)的基因saald，将其克隆到穿梭表达载体pMA5上，以B.subtilis WB600为表达宿主，构建α-乙酰乳酸脱羧酶基因工程菌pMA5-saald/B.subtilis WB600，实现ALDC的高效表达。该工程菌在LB培养基中的发酵酶活较出发菌S.aureus提高了约1200倍，较宿主菌B.subtilis WB600提高约10588倍，达到36000U/L。该重组菌在发酵培养基中发酵培养48h，ALDC酶活达66500U/L。

主权项

一种重组质粒pMA5‑saald，其特征是以Staphylococcus aureus基因组DNA为模板，扩增得到编码α‑乙酰乳酸脱羧酶(ALDC)的基因，将其克隆到枯草芽孢杆菌表达载体pMA5上，获得重组质粒pMA5‑saald。