[发明专利]测定水中As (III)的适配体-纳米金共振瑞利散射光谱法

摘要

本发明公开了一种测定水中As(III)的适配体-纳米金共振瑞利散射光谱法，主要是利用ssDNA和纳米金相互结合形成较稳定的AussDNA探针，保护金纳米粒子不被较高浓度的盐聚集。在pH8.2HEPES缓冲溶液中，当溶液中存在As(III)时，As(III)与AussDNA探针中的ssDNA形成稳定的As-ssDNA复合物，释放出的纳米金在NaCl作用下聚集形成粒径较大的聚集体，导致共振瑞利散射峰强度增强。随着As(III)浓度增大，AussDNA探针释放出来的纳米金越多，纳米金聚集体越大，共振瑞利散射峰强度增强。据此可建立测定As(III)的适配体纳米金共振瑞利散射光谱法。本测定方法的仪器简单，操作简便，快速，灵敏度高、选择性好。

主权项

一种测定水中As (III)的适配体‑纳米金共振瑞利散射光谱法，其特征是：包括如下步骤：（1）制备纳米金适配体探针（AussDNA）：取序列为5’‑TTACAGAACAACCAACGTCGCTCCGGGTACTTCTTCATCG ‑3’的单链DNA（ssDNA），用二次蒸馏水溶解至浓度为390 nmol/L；移取57.9 μg/mL 纳米金6.0 mL于锥形瓶中，在搅拌条件下缓慢加入1.8mL 390 nmol/L ssDNA溶液，加完后继续搅拌15min，密封4℃保存；以ssDNA计算，该AussDNA浓度为90 nmol/L；（2）制备As(III)标准溶液：取5支刻度试管，依次移取200 μL 90 nmol/L AussDNA， 200μL 50 mmol/L pH 8.2 的4‑羟乙基哌嗪乙磺酸钠缓冲溶液(HEPES，含150 mmol/L NaCl)，再分别加入1、10、20、30、60 μL的5760 ng/mL As(III) 标准溶液，混匀，置于超声波仪上超声15 min，再加入40 μL 2.0 mol/L NaCl溶液，用二次蒸馏水定容至1.5 mL，混匀；（3）制备空白对照溶液：用步骤（2）的方法不加As(III)标准溶液制备空白对照溶液；（4）分别取按步骤（2）、(3）制备的As(III)标准溶液及空白对照溶液适量，置于比色皿中，于荧光分光光度计上，设定仪器参数在激发波长等于发射波长的条件下同步扫描各溶液获得共振瑞利散射光谱；278nm波长处测定As(III)标准溶液的共振瑞利散射峰强度I，并测定其空白对照溶液的共振瑞利散射峰强度值(I0)，计算ΔI =I‑ I0；（5）以ΔI对As(III)的浓度关系做工作曲线；（6）被测物样品测定：取含有As(III)的被测物水样；然后移取一定量替换As(III)标准溶液，按步骤（2）～（4）操作，算出被测物的ΔI样＝I样‑I0；（7）根据样品测得的ΔI样，查步骤（5）的工作曲线，计算出被测物水样中As(III)的浓度。