[发明专利]一种多酶体系的仿生固定化方法无效
| 申请号： | 201210390381.X | 申请日： | 2012-10-16 |
| 公开（公告）号： | CN102851273A | 公开（公告）日： | 2013-01-02 |
| 发明（设计）人： | 高静;王洪武;姜艳军 | 申请（专利权）人： | 河北工业大学 |
| 主分类号： | C12N11/08 | 分类号： | C12N11/08 |
| 代理公司： | 天津翰林知识产权代理事务所(普通合伙) 12210 | 代理人： | 赵凤英 |
| 地址： | 300401 天津市北辰*** | 国省代码： | 天津;12 |
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| 摘要： | 本发明是一种固定化多酶体系的工艺方法。该方法包括以下步骤是：1）前驱体溶液的制备：在室温下将TMOS（正硅酸甲酯）加入到1mmol/L的HCl溶液中，TMOS完全溶解、澄清后再加入pH=5-9磷酸缓冲液，混匀；2）固定化酶的制备：将多酶溶液与PDADMA溶液均匀混合，得到含酶溶液A；在30℃恒温条件下，取上步预处理过的前驱体溶液加入到溶液A中，立即振荡，室温静置、离心分离后，用磷酸缓冲液清洗，剩余固体真空冷冻干燥24h即得仿生硅化的多酶。本发明制备固定化酶的方法，制备工艺简单，条件温和，对酶活性损失小，酶活回收率可达85.12%；载体为TMOS，廉价易得。 | ||
| 搜索关键词： | 一种 体系 仿生 固定 方法 | ||
【主权项】：
一种多酶体系的仿生固定化方法，其特征为包括以下步骤：1）前驱体溶液的制备：在室温下将TMOS（正硅酸甲酯）加入到1 mmol/L的HCl溶液中，TMOS完全溶解、澄清后再加入pH=5‑9磷酸缓冲液，混匀；其物料配比为体积比： TMOS： HCl溶液：磷酸缓冲液=0.6 ：4.4：5；2）固定化酶的制备：将多酶（葡萄糖氧化酶和α‑淀粉酶）溶液与PDADMA（6 mg/mL）溶液均匀混合，其配比为体积比：多酶（葡萄糖氧化酶和α‑淀粉酶）溶液：PDADMA溶液=1:1，得到含酶溶液A；在30 ℃恒温条件下，取上步预处理过的前驱体溶液加入到溶液A中，其配比为：前驱体溶液：酶溶液A体积比=1:10，立即振荡，室温静置10‑30 min，离心分离5 min后，用pH=7的磷酸缓冲液清洗，剩余固体真空冷冻干燥24 h即得仿生硅化的多酶。
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