[发明专利]掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物中多糖含量的检测方法有效
申请号: | 201210397189.3 | 申请日: | 2012-10-18 |
公开(公告)号: | CN102879347A | 公开(公告)日: | 2013-01-16 |
发明(设计)人: | 王小艳;王洪伦;袁木荣;索有瑞;吕欢欢;尤进茂 | 申请(专利权)人: | 中国科学院西北高原生物研究所 |
主分类号: | G01N21/31 | 分类号: | G01N21/31 |
代理公司: | 兰州中科华西专利代理有限公司 62002 | 代理人: | 李艳华 |
地址: | 810001 *** | 国省代码: | 青海;63 |
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摘要: | 本发明涉及一种掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物中多糖含量的检测方法,该方法包括以下步骤:⑴掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物溶解于水中,然后加入磷酸缓冲液、淀粉酶,搅拌均匀,经孵化并间歇搅拌,然后取出并加热至沸腾;待沸腾液冷却后转移并补水定容,摇匀过滤,弃去初滤液,收集余下滤液;⑵滤液中加入无水乙醇,摇匀后静置,经离心得到沉淀物A;⑶沉淀物用热乙醇洗涤,重复数次,合并得到沉淀物B;沉淀物B用水溶解并定容,得到供试品溶液;⑷以葡萄糖为标准物质制作标准曲线,然后测定供试品溶液吸光值,并算得供试品溶液中多糖浓度;⑸根据公式计算即可得到掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物中的多糖含量。本发明可实现定量分析的目的。 | ||
搜索关键词: | 糖类 干扰 枸杞 多糖 提取物 含量 检测 方法 | ||
【主权项】:
1. 掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物中多糖含量的检测方法,包括以下步骤:⑴称取掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物MS g,并溶解于V1mL水中,然后加入pH值为6.0~7.0、体积为0.01~0.05倍的V1 mL 的磷酸缓冲液,再加入0.1~0.5倍MS g质量的淀粉酶,搅拌均匀,放置于60~80℃孵化60~90分钟并间歇搅拌,然后取出并加热至沸腾;待沸腾液冷却后转移并补水定容至V1 mL ,摇匀,过滤,弃去初滤液,收集余下滤液;⑵准确吸取所述滤液V2 mL,加入体积为3~5倍V2 mL的无水乙醇,摇匀后静置10~60 min,经离心,得到沉淀物A;⑶所述沉淀物A用质量浓度为70%~95%、温度为50℃的热乙醇洗涤,经离心弃去洗涤上清液,收集沉淀,重复2~4次,合并得到沉淀物B;所述沉淀物B用水溶解并定容至V3 mL,得到供试品溶液;⑷以葡萄糖为标准物质,用硫酸-蒽酮试剂或苯酚-硫酸试剂按相应常规方法制作标准曲线,然后吸取所述供试品溶液1mL按标准曲线的相同方法测定其吸光值,并将吸光值代入标准曲线方程算得供试品溶液中的多糖浓度C mg/mL;⑸再根据下式计算即可得到掺有糖类干扰物的枸杞多糖提取物中的多糖含量W:。
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