[发明专利]一种适用于低品位铜尾矿浸出的浸矿细菌诱变选育方法

摘要

一种适用于低品位铜尾矿浸出的浸矿细菌诱变选育方法，具体步骤如下：从铜矿山尾矿库附近的土壤中取回含有浸矿细菌，预处理后取上清液为精制样品，采用改进型4.5-9K培养基进行分离纯化后，加入含铜尾矿，进行驯化培养后，在盐酸羟胺质量浓度为0.5-3.0%的改进型4.5K培养基中进行化学诱变培养；将菌液放在微波炉中于功率500-700W、脉冲频率2450MHz诱变培养，微波辐射30s-120s；在黑暗环境中放置4-7h后接入到改进型4.5K培养基中进行连续活化培养4-6次，获得复合诱变菌。用于低品位含铜尾矿的浸出处理，浸出40d时，浸出率为35-40%，周期可缩短1/4-1/3，浸矿效果明显提高。

主权项

一种适用于尾矿浸出的浸矿细菌诱变选育方法，其特征在于该方法的具体步骤是：（1）原始菌种的筛选：从铜矿山尾矿库附近的土壤中取回含有浸矿细菌的样品，进行预处理后取上清液作为精制样品，然后采用改进型4.5K 培养基进行富集培养和分离纯化，经筛选、纯化分离后获得嗜酸浸矿菌种；（2）浸矿菌种的驯化：将上述步骤获得的嗜酸浸矿菌种在改进型4.5K培养基中，加入粒度小于0.075mm的低品位含铜尾矿，使矿浆浓度为5%，细菌接种浓度为1.0×108cell·mL‑1，放入控温振荡箱中以140‑160rpm的转速在30℃条件下振荡驯化培养20‑28d后，取含菌上清液进行下一步驯化，采用4.5K无铁培养基，并逐步递增矿浆浓度至30%，阶段驯化后获得具有较好氧化活性的浸矿菌种；（3）驯化后菌种的诱变：将上述步骤获得的浸矿菌种在5000‑8000r/min下离心20‑30min，去上清液得到沉淀，用pH值为2.0预先灭过菌的硫酸溶液对沉淀进行洗涤，然后再离心去上清液，如此反复操作三次，以达到去除菌液中Fe3+的目的，得到无铁细胞悬浊液，在盐酸羟胺质量浓度为0.5%‑2.5%的改进型4.5K培养基中，接种10%无铁细胞悬浊液进行化学诱变培养，培养6‑8天后，接种菌液进行重复诱变，反复重新接种培养3次，将经盐酸羟胺处理后的菌液放在微波炉中进行微波诱变培养，取菌液样10mL于直径90mm培养皿中，采用功率500‑700W、脉冲频率为2450MHz，微波辐射时间30s‑120s，诱变后将培养皿在黑暗环境中放置4‑7h后接入到改进型4.5K培养基中进行连续活化培养4‑6次，获得最终诱变菌。