[发明专利]五重荧光PCR快速超敏检测试剂盒及其应用

摘要

本发明涉及在单个PCR反应容器中五重检测核酸提取液中靶核酸的实时PCR方法，用于检测样品中淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人型支原体和生殖支原体。

主权项

在单个PCR反应容器中五重检测核酸提取液中靶核酸的实时PCR方法，所述靶核酸来自淋病奈瑟菌、沙眼衣原体、解脲支原体、人型支原体和生殖支原体，其包括，（1）在所述单个PCR反应容器中混合核酸提取液、DNA聚合酶、dNTP、靶核酸引物对和靶核酸探针，其中所述探针标记有荧光基团和淬灭基团，而且各种探针标记的荧光基团的荧光检测波长互不相同，其中，靶核酸引物对包括ACCGTAACGTCTCTAAGTC，GCAAGATTTCCGATTTGGC，TGTCCATATCTTTGATACGAT，CTCTGATATTTGAAGACTCTACA，CTGCTCGTGAAGTATTACA，GTACCATCTGGGAAAGTAC，TGTGGTTTAATTTGAAGATACAT，AGTCCTCAACTTAATGTTAGA，AGGCAGTAATGTCAATCACA，和GGCTTTATCATTGGCAAACG，靶核酸探针包括：CAGACATCACGCACCGAAGCAT，CCAAGCCGAGTCTACAGTTATAGGTCA，ACCAACCATTGTATCTACACCTTCCATA，CCACTCTTGACATCCTTCGCATA，和CCATTCGCATCCAACTTCACCTCT；（2）进行PCR反应，并实时检测不同波长的荧光；和，（3）根据荧光检测结果计算出的Ct值判断是否有靶核酸存在于样品中。