[发明专利]一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法无效
申请号: | 201210416206.3 | 申请日: | 2012-10-26 |
公开(公告)号: | CN102898516A | 公开(公告)日: | 2013-01-30 |
发明(设计)人: | 姚善泾;杜巧燕;林东强 | 申请(专利权)人: | 浙江大学 |
主分类号: | C07K14/79 | 分类号: | C07K14/79;C07K1/18 |
代理公司: | 杭州求是专利事务所有限公司 33200 | 代理人: | 张法高 |
地址: | 310027 浙*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明提供了一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法。包括以下步骤:1)甜乳清粉加水溶解制成乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH;2)扩张床内装填阳离子交换层析介质,用磷酸盐缓冲液从下向上通过床层,平衡扩张床;3)通入步骤1)的溶液进行吸附,再用含NaCl的缓冲液进行洗脱,收集洗脱液;4)最后用NaOH清洗,并用缓冲液再生介质。本发明以扩张床吸附为核心分离方法,一步分离得到乳铁蛋白的纯度能达到88~93%之间,回收率在47%~86%之间,工艺简便高效,设备投资低,适合工业化生产。 | ||
搜索关键词: | 一种 扩张 吸附 技术 乳清中 提纯 铁蛋白 方法 | ||
【主权项】:
一种用扩张床吸附技术从乳清中提纯乳铁蛋白的方法,其特征在于包括以下步骤:1)甜乳清粉加水溶解制成质量百分比浓度为20~80 g/L的乳清溶液或采用市售液态乳清液,用NaOH调节pH至7.0 ~8.0;2)扩张床内装填阳离子交换层析介质,阳离子交换介质为Streamline SP,Streamline SP XL或Fastline SP;用pH7.0 ~8.0的磷酸盐缓冲液从下向上通过床层,平衡扩张床,床层稳定膨胀时,膨胀率介于1.8~2.6;3)通入步骤1)的溶液进行吸附,然后通入步骤2)所用的缓冲液冲洗直至没有蛋白洗出,再用含0.1~1 M NaCl的pH7.0~10.0的磷酸盐缓冲液或者碳酸盐缓冲液洗脱,收集洗脱液,其纯度为88~93%,乳铁蛋白回收率为47%~86%;4)最后用0.2~0.5 M NaOH在位清洗,并用pH7.0的磷酸盐缓冲液使介质再生。
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