[发明专利]一种1,5-脱水葡糖醇的脱氢酶法测定方法无效
申请号: | 201210417853.6 | 申请日: | 2012-10-16 |
公开(公告)号: | CN103725748A | 公开(公告)日: | 2014-04-16 |
发明(设计)人: | 潘利琴 | 申请(专利权)人: | 温州市人民医院 |
主分类号: | C12Q1/48 | 分类号: | C12Q1/48;C12Q1/32;C12Q1/26 |
代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
地址: | 325000*** | 国省代码: | 浙江;33 |
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摘要: | 本发明涉及一种1,5-脱水葡糖醇的脱氢酶法测定方法,可广泛应用在医学及生物化学技术领域。其特点是:用ATP依赖性己糖激酶(ATP-HK)将待测物1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)和主要干扰物葡萄糖(Glu)分别转化为1,5-脱水葡萄糖醇-6-磷酸(1,5-AG-6-P)和葡萄糖-6磷酸(Glu-6-P),通过系统中的丙酮酸激酶(PK)和磷酸烯醇式丙酮酸盐(PEP),建立ATP再生系统,确保1,5-AG和Glu分别向1,5-AG-6-P和Glu-6-P转化。转化后的1,5-AG-6-P被1,5-脱水葡萄糖醇-6-磷酸脱氢酶(AG6PDH)特异性地脱氢氧化,同时使2-(4-碘苯)-5-(2,4-二硝基苯)-5-(2,4-二磺基苯)-2H-四氮唑(WST-5)还原为有色物质,用全自动生化分析仪比色定量。 | ||
搜索关键词: | 一种 脱水 葡糖 脱氢酶 测定 方法 | ||
【主权项】:
一种1,5‑脱水葡糖醇的脱氢酶法测定方法,其特征是用ATP依赖性已糖激酶(ATP‑HK)将待测物1,5‑脱水葡萄糖醇(1,5‑AG)和主要干扰物葡萄糖(Glu)分别转化为1,5‑脱水葡萄糖醇‑6‑磷酸(1,5‑AG‑6‑P)和葡萄糖‑6磷酸(Glu‑6‑P),通过系统中的丙酮酸激酶(PK)和磷酸烯醇式丙酮酸盐(PEP),建立ATP再生系统,确保1,5‑AG和Glu分别向1,5‑AG‑6‑P和Glu‑6‑P转化。转化后的1,5‑AG‑6‑P被1,5‑脱水葡萄糖醇‑6‑磷酸脱氢酶(AG6PDH)特异性地脱氢氧化,同时使2‑(4‑碘苯)‑5‑(2,4‑二硝基苯)‑5‑(2,4‑二磺基苯)‑2H‑四氮唑(WST‑5)还原为有色物质,用全自动生化分析仪比色定量。
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