[发明专利]基于拉曼光谱的尿素同位素丰度的快速检测方法

摘要

本发明涉及一种基于拉曼光谱的尿素同位素丰度的快速检测方法。传统检测方法速度慢且操作复杂。本发明首先待测¹⁵N双标记尿素直接放在载玻片中心，用盖玻片轻轻按压，使之表面平整，得到样本。然后样本固定在显微拉曼光谱仪的显微镜镜头下方的载物台上，调节显微镜的放大倍数，使样本能够在目镜视场内清晰成像，使用激光器，收集3500cm^-1～34.4cm^-1范围的拉曼光谱。最后基于样本在3500cm^-1～34.4cm^-1范围的拉曼光谱，采用连续投影算法筛选出特定的指纹波段，得到在该波段处的拉曼光谱强度值，利用拉曼光谱强度值计算同位素丰度。本发明使用方便，可以快速、有效的测量植物¹⁵N示踪同位素丰度。

主权项

 基于拉曼光谱的尿素同位素丰度的快速检测方法，其特征在于该方法包括以下步骤：步骤1.取1‑10毫克待测¹⁵N双标记尿素直接放在载玻片中心，用盖玻片轻轻按压，使之表面平整，然后拿掉盖玻片，得到样本；步骤2.将制备好的样本固定在显微拉曼光谱仪的显微镜镜头下方的载物台上，调节显微镜的放大倍数，使样本能够在目镜视场内清晰成像，使用532nm半导体高功率激光器，激光功率为5mv，曝光时间为5s,曝光次数为3次，采集孔径为50μm, 物镜为50倍，在上述条件下采集样本的拉曼光谱，收集3500cm^‑1～34.4cm^‑1范围的拉曼光谱；步骤3.基于样本在3500cm^‑1～34.4cm^‑1范围的拉曼光谱，采用连续投影算法筛选出¹⁵N双标记尿素同位素丰度测量的指纹波段，分别为512cm^‑1， 990cm^‑1,999cm^‑1,1700cm^‑1和3470cm^‑1，得到样本在波数分别在512cm^‑1， 990cm^‑1,999cm^‑1,1700cm^‑1和3470cm^‑1处的拉曼光谱强度值，依次为、、、和，利用这五个值计算同位素丰度：。