[发明专利]一种成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体的构建方法无效
申请号: | 201210425334.4 | 申请日: | 2012-10-31 |
公开(公告)号: | CN103060375A | 公开(公告)日: | 2013-04-24 |
发明(设计)人: | 王建民;陈菁;刘斌剑;陈魁君;许川;陈志强;李冠桦;苟元彬 | 申请(专利权)人: | 王建民 |
主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/12;C07K14/71;C12Q1/68;G01N33/68 |
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地址: | 400042 重*** | 国省代码: | 重庆;85 |
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摘要: | 本发明一种成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体的构建方法,包括以下步骤:FGFR2 IIIc表达载体的获得与测序鉴定;FGFR2 IIIb 3-11外显子片段的获得;FGFR2 IIIb腺病毒表达载体的构建;FGFR2 IIIb腺病毒的包装。利用本发明构建的成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体,采用昆明白小鼠进行实验表明,博莱霉素60mg/kg体重气管内灌注在第3-4周能引起较明显的肺纤维化发生;采用前述构建的KGFR腺病毒表达载体,通过96孔板荧光计数法检测Ad-KGFR病毒原液的滴度为3 106PFU/mL。以该滴度的KGFR腺病毒300ml与博莱霉素(60mg/kg体重)共同气管内灌注,分别于1,2,3,4周后HE染色观察肺纤维化发生情况。结果表明,KGFR的表达增强后,博莱霉素作用后不同时间肺纤维化的发生有较明显的减轻。 | ||
搜索关键词: | 一种 纤维 细胞 生长因子 ii 受体 iiib 剪切 构建 方法 | ||
【主权项】:
一种成纤维细胞生长因子II型受体IIIb剪切体的构建方法,其特征在于,该构建方法包括以下步骤:FGFR2 IIIc表达载体的获得与测序鉴定;FGFR2 IIIb 3‑11外显子片段的获得;FGFR2 IIIb腺病毒表达载体的构建;FGFR2 IIIb腺病毒的包装。
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