[发明专利]一种通用型水稻工程保持系的培育方法及其在水稻普通核不育系繁殖中的应用

摘要

本发明公开了一种通用型水稻工程保持系的培育方法，包括以下步骤：构建颜色标记基因C的双元表达载体；采用转基因方法将载体转入基因型为SS的品种得到转基因株系；再通过自交繁殖获得纯合株系；分析各纯合株系中基因C的插入位点，并筛选、构建得到工程保持系候选库；将基因型为ss的水稻普通核不育系与该候选库中的纯合株系进行杂交，获得F1，F1自交繁殖获得F2，将F2中不带颜色的种子进行培育，调查培育后各组F2株系中的不育株数，筛选出不育株数占比98%以上的F2来源的F1种子作为工程保持系。本发明的培育方法具有周期短、通用性强、效率高等优点，培育的工程保持系可在水稻普通核不育系的机械化、规模化繁殖中进行应用。

主权项

一种通用型水稻工程保持系的培育方法，包括以下步骤：（1）准备基因型为ss的水稻普通核不育系，s表示控制水稻普通核不育系不育性状的不育基因；（2）构建颜色标记基因C的双元表达载体；（3）采用现有的转基因方法将所述双元表达载体转入基因型为SS的上述水稻普通核不育系的来源亲本或育性正常的品种中，筛选得到带有颜色标记基因C的T0代转基因株系；再将T0代转基因株系通过不断的自交繁殖获得带有单拷贝颜色标记基因的纯合株系，其基因型为SSCC；（4）分析步骤（3）所获得的每个纯合株系中颜色标记基因C在水稻基因组中的插入位点，并根据颜色标记基因C在水稻基因组的插入位置，筛选出一系列单拷贝的纯合株系组库，使纯合株系组库中的水稻基因组每隔0~2cM就有一个颜色标记基因C，该纯合株系组库即构成了一个工程保持系候选库；（5）将步骤（1）中的水稻普通核不育系与步骤（4）中工程保持系候选库中的每个纯合株系进行杂交，获得F1杂合种子，F1杂合种子自交繁殖一代获得多种基因型的F2种子，然后通过色选工艺先剔除F2种子中带有颜色标记基因C的种子，将剩余不带颜色标记基因C的各组F2种子分别进行培育，获得对应的各组F2株系，调查前述各组F2株系中的不育株数，筛选出不育株数占比≥98%的F2株系组，并将该F2株系组来源的F1杂合种子作为所述水稻普通核不育系的工程保持系。