[发明专利]尿苷二磷酸-葡萄糖脱氢酶的表达及酶活测定在审
申请号: | 201210427802.1 | 申请日: | 2012-10-31 |
公开(公告)号: | CN102936603A | 公开(公告)日: | 2013-02-20 |
发明(设计)人: | 钱悦;侯永泰;吴剑英;陈奕涵;甘人宝;周庆玮;荣绍丰 | 申请(专利权)人: | 上海昊海生物科技股份有限公司 |
主分类号: | C12N15/70 | 分类号: | C12N15/70;C12N9/04;C12N1/21;C12R1/19 |
代理公司: | 上海专利商标事务所有限公司 31100 | 代理人: | 陈静 |
地址: | 201613 上*** | 国省代码: | 上海;31 |
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摘要: | 本发明涉及尿苷二磷酸-葡萄糖脱氢酶的表达及酶活测定。本发明人将PL启动子、大肠杆菌UDP-GlcDH的基因(ugd)串联构建表达质粒,将所述表达质粒转化原核菌株,利用该菌株温度诱导表达UDP-GlcDH,并对其酶活性进行测定。采用该表达方法得到的UDP-GlcDH,表达效率高,酶活性高,酶活性保持的持续时间长。 | ||
搜索关键词: | 二磷酸 葡萄糖 脱氢酶 表达 测定 | ||
【主权项】:
一种重组表达尿苷二磷酸‑葡萄糖脱氢酶的方法,包括:(1)提供表达构建物,其从5’至3’端依次包括以下操作性连接的元件:噬菌体PL启动子,编码尿苷二磷酸‑葡萄糖脱氢酶的基因ugd;(2)将(1)的表达构建物转化大肠杆菌,进行升温诱导表达,迅速升温到38‑42℃,振荡培养8‑15小时。
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