[发明专利]动态高压微射流-酶解法制备低过敏性β-乳球蛋白方法

摘要

一种动态高压微射流-酶解法制备低过敏性β-乳球蛋白方法，是以牛乳中的β-乳球蛋白为主要原料，运用新兴的物理加工手段动态高压微射流技术结合胰蛋白酶酶解技术处理β-乳球蛋白，得到低过敏性的β-乳球蛋白产品。利用本方法制备的低过敏性β-乳球蛋白具有良好的功能性，且该方法可有效降低或消除β-乳球蛋白过敏性；本发明安全性高、无副作用。

主权项

一种动态高压微射流‑酶解法制备低过敏性β‑乳球蛋白方法，其特征是：（1）按1mg/mL的浓度比例配制β‑乳球蛋白溶液，在常温条件下，取1gβ‑乳球蛋白样品溶于1L二次去离子水中，采用磁力搅拌器在50‑80rpm的转速下搅拌5‑10min使蛋白质完全溶解；（2）采用动态高压微射流处理步骤（1）所得的β‑乳球蛋白溶液，经过160MPa压力处理，处理次数为3次，收集处理后的样品进行冻干，得到压力改性后的β‑乳球蛋白样品；（3）将步骤（2）所得样品、10,000U/mg的胰蛋白酶和胰蛋白酶抑制剂分别溶于50mM、pH7.8和离子强度为0.08MNaCl的Tris缓冲液中，浓度分别配制为0.66mM ，0.56µM和8.5µM，备用；（4）将步骤（3）所配制成的β‑乳球蛋白和胰蛋白酶溶液按1:40的酶与底物的比值混合均匀，在37℃恒温水浴中进行50rpm的转速搅拌反应30min，反应结束迅速后加入体积比12.5%步骤3所配制好的胰蛋白酶抑制剂终止反应，收集反应后的样品；（5）将步骤（4）所得样品溶液采用截留分子量为20kDda的超滤管，在8000r/min条件下离心10min进行超滤，超滤所得溶液冻干即为低致敏性β‑乳球蛋白。