[发明专利]厄洛替尼、吉非替尼靶向用药基因的检测方法及其引物

摘要

本发明涉及分子生物学基因技术领域和医学领域，具体公开了用于检测厄洛替尼和吉非替尼靶向用药相关基因突变的方法及其引物。本发明对EGFRmutT790M、EGFRmutL858R、EGFRmutdel、Krasmut这4个基因的突变位点相关核酸序列进行分析，设计相应的引物，对样本基因组DNA特定位点经过多重PCR扩增后，最后以Ion Torrent半导体芯片测序技术进行检测。本发明的检测方法具有通量大，特异性及灵敏度高，结果稳定，重复性好，检测速度快的优点。为厄洛替尼和吉非替尼靶向用药的检测、测试、分析和评估提供了一条快速、可靠、准确的新途径，从而为筛选敏感个体的以及个性化用药提供理论基础。

主权项

一种检测厄洛替尼、吉非替尼靶向用药基因突变的方法，其特征在于，具体步骤为：利用生物信息学知识和相关生物信息学软件，对公开数据库中所能检索到的EGFRmutT790M、EGFRmutL858R、EGFRmutdel和Krasmut四种基因序列的突变位点，用Primer Express Software 5.0软件设计PCR引物；采用多重PCR的方法对待检测样本进行PCR扩增；将PCR扩增产物进行扩增子文库的构建，ISP(Ion Sphere^TM Particles，Ion微球)模板的制备，在Ion Torrent PGM系统上进行测序，并用软件对相关测序序列进行分析。