[发明专利]菊芋果聚糖的提取与检测方法有效
申请号: | 201210457010.9 | 申请日: | 2012-11-14 |
公开(公告)号: | CN102944622A | 公开(公告)日: | 2013-02-27 |
发明(设计)人: | 梁明祥;李辉;康健 | 申请(专利权)人: | 南京农业大学 |
主分类号: | G01N30/02 | 分类号: | G01N30/02;G01N30/06 |
代理公司: | 南京天华专利代理有限责任公司 32218 | 代理人: | 徐冬涛;傅婷婷 |
地址: | 210095 *** | 国省代码: | 江苏;32 |
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摘要: | 本发明属于分析检测领域,涉及一种菊芋果聚糖的提取与检测方法。发明者在菊芋植物样品提取中,采用GRACE公司的GracePureTM SPE C18-Max柱进行样品过滤,该柱可以去除水溶液中的极性物质,几乎对糖分无吸附,可有效的降低检测的背景。采用普通HPLC仪器,但选用对糖份分离非常好的GRACE公司PREVAIL Carbohydrate ES专用糖柱,该糖柱为聚苯乙烯一二乙烯基苯键合的氨基糖柱,不存在困扰其他氨基柱的问题,没有化学降解现象,且在室温及梯度洗脱的情况下亦很稳定;糖分检测采用ELSD检测器,首次建立了一整套菊芋植物样品果聚糖的提取和检测流程。 | ||
搜索关键词: | 菊芋 聚糖 提取 检测 方法 | ||
【主权项】:
菊芋果聚糖的提取与检测方法,其特征在于包含以下步骤:(1)菊芋组织可溶性总糖的提取与纯化:a菊芋组织鲜样于烘箱中70~80℃下恒温烘40~55h,b组织样品研磨后,与去离子水按1:2~5的质量体积比混匀,放进100℃的水浴锅中15~25分钟,反复抽提3~5次,收集三次提取的所有溶液以去除蛋白,c将b中所得的溶液过滤,滤液8000~12000g离心20~30分钟,收集上清,d上步获得的滤液过固相萃提柱GracePureTM SPE C18‑Max,e滤液过0.45μm水相滤膜过滤,作为下一步HPLC的样品;(2)菊芋果聚糖的检测:上一步制备的样品通过HPLC检测,检测条件如下:色谱柱:PrevailTM Carbohydrate ES Coloumn‑W250*46mm 5um;检测器:蒸发光检测器ELSD,Alltech 3300;进样量:10ul;流速:1ml/min,每次样品的运行时间为55min,流动相:B相:水,C相:乙腈;洗脱方式:梯度洗脱,洗脱程序如表1所示:表1 时间(min)%B%C10257521535653305050440505054225756552575
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