[发明专利]采用光激发化学发光免疫分析对血清中的待测靶物质进行定性与定量检测的方法

摘要

本发明公开了一种采用光激发化学发光免疫分析对血清中的靶物质进行定性与定量检测的方法，包括向待测标本中加入包被靶物质抗体的发光微球、生物素包被靶物质抗体、链亲和素（SA）包被的感光微球进行第一次免疫反应和检测的步骤，还包括向反应体系中加入抗He试剂发生靶物质免疫叠加反应，并进行第二次光激发化学发光免疫检测的步骤。本发明通过对两次LiCA检测结果的综合分析达到全方位纠正Hooks效应的目标，分析过程包括根据其在一次LiCA与二次LiCA检测的信号特征将被检标本区分为阴、低阳、中阳，高阳与超高阳等五个浓度区间；根据第一次LiCA对低阳与超高阳浓度区段的标本进行定量分析。本发明具有结果准确，操作简便，适用范围广等特点。

主权项

一种采用光激发化学发光免疫分析对血清中的待测靶物质进行定性或定量检测的方法，包括如下步骤：向血清中依次加入包被靶物质抗体的发光微球、生物素标记的靶物质抗体、链亲和素包被的感光微球，混匀后温育以发生免疫反应；然后用激发光激发上述免疫反应后的反应体系，并第一次检测反应体系所发出的发射光的光子信号强度，检测出的光子信号强度依据靶物质浓度与发光信号强度的标准曲线关系，第一次确定靶物质含量；其特征在于：在第一次检测反应体系所发出的发射光的光子信号强度后，向免疫反应后的反应体系中加入抗He试剂，混匀后温育发生免疫叠加反应；然后用激发光激发上述免疫叠加反应后的反应体系，并第二次检测反应体系所发出的发射光的光子信号强度；根据第一次和第二次的光子信号强度推导新的靶物质含量与信号强度的关系，并据此计算待测标本中的靶物质浓度：所述的反应体系与抗He试剂的体积比为5‑50:1；所述待测靶物质为抗原时，所述的抗He试剂中靶物质的浓度为10‑200000ng/ml；所述待测靶物质为抗体时，所述的抗He试剂中靶物质的浓度为1‑20000IU/ml。